OCSE TG 439

OECD TG 439, linee guida per i test dell'OCSE per i test chimici, Sezione 4 (Impatto per la salute) Come parte di "Irritazione cutanea in vitro: metodo di prova con epidermide umana ricostruita (rhe)”, i. H "Irritazione cutanea in vitro: metodo di prova con epidermide umana ricostruita (Rh)". È stato adottato per la prima volta nel 2010, aggiornato nel 2015 e il suo ambito è stato ampliato attraverso successive revisioni. Come parte degli effetti sulla salute, è un test di tossicità in vitro e un approccio che non richiede esperimenti sugli animali.

Avviso sullo stato di regolamentazione: il TG 439 è presentato nell'UE ai sensi del regolamento CLP (CE 1272/2008) e per REACH e il divieto di esperimenti sugli animali per i prodotti cosmetici ampiamente utilizzati. L'attuale versione e le ultime revisioni all'ambito della domanda dovrebbero essere riviste utilizzando fonti ufficiali dell'OCSE prima dell'inizio dell'indagine.

Il principio di base del test è il seguente:

La sostanza in esame viene applicata topicamente sulla superficie del tessuto epidermide umana ricostruita (RHE). RHE è un modello di epidermide multistrato e differenziato costituito da cheratinociti umani (ad esempio, modelli convalidati come episkin, epiderma, rhe skinetico, modello epi labcyte, epics).
La durata dell'esposizione dipende dalle condizioni fisiche della sostanza in esame: Per i liquidi, di solito 15 minuti, sui solidi di solito 4 ore.
Dopo che il tempo di esposizione è scaduto, la sostanza in esame viene rimossa dal tessuto (lavata via) ei tessuti vengono incubati per un certo periodo di tempo.
La vitalità cellulare viene misurata con il test MTT. MTT viene convertito in sale formazano dalle deidrogenasi mitocondriali delle cellule viventi; La quantità di formazan formata è proporzionale al numero di cellule viventi.
La percentuale di vitalità cellulare viene calcolata rispetto ai tessuti di controllo negativi.
Il risultato viene interpretato utilizzando soglie convalidate: Se la vitalità è ≤ 50%, la sostanza è classificata come irritante (categoria 2); A > 50%, è considerato non irritante.
Se necessario, la convalida può essere eseguita con un secondo modello RHE o marcatori aggiuntivi (ad es. rilascio di IL-1α, IL-8).

Il TG 439 fa parte della strategia di test sequenziale. In primo luogo, vengono valutate le proprietà fisico-chimiche (ad es. pH ≤ 2 o ≥ 11,5) e test di corrosività in vitro (TG 430, TG 431); Nel caso di sostanze non corrosive, l'effetto di irritazione viene valutato secondo il TG 439. Questo approccio fa parte della strategia sequenziale definita in TG 404 OCSE e rende i test in vivo in gran parte superflui.

I parametri chiave riportati nello studio sono:

Il modello RHE e le informazioni sul produttore e sulla convalida
Stato aggregato della sostanza in esame (liquido/solido) e quantità di applicazione
Durata dell'esposizione (15 min per liquidi; 4 ore per solidi) e condizioni d'uso
Dopo l'esposizione tempo di incubazione e processo di lavaggio
Vitabilità cellulare (%) (per ogni tessuto parallelo) e media
Risultati dei controlli positivi (ad es. SDS, stimolanti chimicamente noti) e negativi
Conferma che i controlli soddisfano i criteri di validità
Risultato: Irritabile (Categoria 2) / Non irritante - Valutazione e giustificazione
Dati su incertezza di misura e ripetibilità

Qual è lo scopo dell'indagine?

L'OCSE TG 439 viene effettuato per le seguenti finalità scientifiche e regolamentari:

Determinazione del potenziale di stimolo dermico: Valutazione del potenziale di una sostanza per indurre irritazioni reversibili dopo il contatto con la pelle
GHS/CLP Classificazione: Determinare se la sostanza deve essere classificata come irritante per la pelle Categoria 2 e l'identificazione dei requisiti di etichettatura (H315)
Protezione animale (3R): In alternativa al test di irritazione cutanea in vivo draize (TG 404), si evita l'uso di animali; Conformità al divieto di sperimentazione animale per prodotti cosmetici
Strategia del test di fase: Completamento della valutazione dell'irritazione in vitro dopo test di corrosività (TG 430, TG 431)
Supporto per i documenti di registrazione: Utilizzo nelle valutazioni di sicurezza REACH, biocidi, pesticidi, cosmetici e prodotti chimici industriali
Prodotto ed etichettatura: Definizione di avvertenze e misure di sicurezza per proteggere consumatori e dipendenti
Formulazione e sviluppo dei materiali: diagnosi precoce di nuovi prodotti e materiali
Evidenze approssimative: Contributo alla valutazione olistica della sostanza in relazione ad altri dati fisico-chimici, in vitro e in vivo

L'OCSE TG 439 fornisce solo una valutazione irritante; Corsity (TG 430, TG 431), sensibilizzazione (serie TG 442), Tossicità sistemica e Fototossicità non rientrano nell'ambito di questa standard. Inoltre, i modelli RHE non riflettono completamente l'intero spessore della pelle umana (compreso il derma) né le reazioni sistemiche. I risultati devono essere interpretati in relazione alle proprietà fisico-chimiche della sostanza e ad altri dati tossicologici.

Come nanotest, eseguiamo i test di irritazione cutanea in vitro in conformità con l'OCSE TG 439 come parte della nostra infrastruttura di laboratorio accreditata e il nostro sistema di gestione della qualità con cura scientifica.

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