OCDE TG 439

OCDE TG 439, OECD-Prüfrichtlinien für die Prüfung von Chemikalien, Abschnitt 4 (Gesundheitliche Auswirkungen) im Rahmen der „In-vitro-Hautreizung: Testmethode mit rekonstruierter menschlicher Epidermis (RhE)“, d. h. „In-vitro-Hautreizung: Testmethode mit rekonstruierter menschlicher Epidermis (RhE)“. Er wurde erstmals im Jahr 2010 verabschiedet, 2015 aktualisiert und durch nachfolgende Überarbeitungen wurde sein Anwendungsbereich erweitert. Im Rahmen der gesundheitlichen Auswirkungen handelt es sich um einen In-vitro- Toxizitätstest und um einen ansatz, der ohne Tierversuche auskommt.

Remarque concernant le statut réglementaire : le TG 439 est largement utilisé dans l'UE dans le cadre du règlement CLP (CE 1272/2008) et de REACH, ainsi que dans le cadre de l'interdiction des essais sur les animaux pour les produits cosmétiques. La version actuelle et les dernières révisions concernant le champ d'application doivent être vérifiées à l'aide de sources officielles de l'OCDE avant le début de l'étude.

Le principe de base du test est le suivant :

La substance d'essai est appliquée par voie topique à la surface du tissu épidermique humain reconstitué (RhE). Le RhE est un modèle d'épiderme multicouche et différencié, constitué de kératinocytes humains (par exemple, des modèles validés tels que EpiSkin, EpiDerm, SkinEthic RHE, LabCyte EPI-MODEL, epiCS).
Die Expositionsdauer hängt vom physikalischen Zustand der Testsubstanz ab: bei Flüssigkeiten in der Regel 15 Minuten, bei Feststoffen in der Regel 4 Stunden.
À l'issue de la période d'exposition, la substance d'essai est éliminée du tissu (lavage) et les tissus sont encore incubés pendant un certain temps.
La viabilité cellulaire est mesurée à l'aide du test MTT. Le MTT est transformé en sel de formazane par les déshydrogénases mitochondriales des cellules vivantes ; la quantité de formazane formée est proportionnelle au nombre de cellules vivantes.
Le pourcentage de viabilité cellulaire est calculé par rapport aux tissus témoins négatifs.
Le résultat est interprété à l'aide de seuils validés : si le taux de viabilité est ≤ 50 %, la substance est classée comme irritante (catégorie 2) ; s'il est > 50 %, elle est considérée comme non irritante.
Si nécessaire, une validation peut être effectuée à l'aide d'un deuxième modèle RhE ou de marqueurs supplémentaires (par exemple, libération d'IL-1α et d'IL-8).

La TG 439 s'inscrit dans la stratégie d'essais séquentielle. Dans un premier temps, les propriétés physico-chimiques (par exemple, un pH ≤ 2 ou ≥ 11,5) ainsi que les essais de corrosivité in vitro (TG 430, TG 431) sont évalués ; pour les substances non corrosives, l'évaluation de l'effet irritant s'effectue conformément à la TG 439. Cette approche s'inscrit dans la stratégie séquentielle définie dans la TG 404 de l'OCDE et rend les essais in vivo largement superflus.

Les paramètres clés présentés dans l'étude sont les suivants :

Le modèle RhE utilisé, ainsi que les informations relatives au fabricant et à la validation
État physique de la substance d'essai (liquide/solide) et la quantité utilisée
Durée d'exposition (15 min pour les liquides ; 4 heures pour les solides) et conditions d'utilisation
Après l'exposition : période d'incubation et procédure de lavage
Viabilité cellulaire (%) (pour chaque échantillon parallèle) et valeur moyenne
Résultats des contrôles positifs (par exemple, SDS, substance irritante chimiquement identifiée) et négatifs
Confirmation que les contrôles répondent aux critères de validité
Résultat : irritant (catégorie 2) / non irritant – Évaluation et justification
Données relatives à l'incertitude de mesure et à la répétabilité

À quoi sert cet examen ?

Le projet TG 439 de l'OCDE est mené à des fins scientifiques et réglementaires, notamment :

Détermination du potentiel d'irritation cutanée : évaluation de la capacité d'une substance à provoquer une irritation réversible après contact avec la peau
Classification GHS/CLP : déterminer si la substance doit être classée comme irritante pour la peau de catégorie 2 et identifier les exigences en matière d'étiquetage (H315)
Bien-être animal (3R) : cette méthode, qui constitue une alternative au test d'irritation cutanée in vivo de Draize (TG 404), permet d'éviter l'utilisation d'animaux ; respect de l'interdiction des expérimentations animales pour les produits cosmétiques
Stratégie d'essai par étapes : achèvement de l'évaluation de l'irritation in vitro après les essais de corrosivité (TG 430, TG 431)
Assistance pour les dossiers d'autorisation : intervention dans le cadre des évaluations de sécurité au titre du règlement REACH, pour les biocides, les produits phytopharmaceutiques, les cosmétiques et les produits chimiques industriels
Sécurité des produits et étiquetage : définition des avertissements et des mesures de sécurité visant à protéger les consommateurs et les employés
Développement de formulations et de matériaux : identification précoce de nouveaux produits et matériaux
Approche fondée sur la force probante : contribution à l'évaluation globale de la substance en liaison avec d'autres données physico-chimiques, in vitro et in vivo

La norme OCDE TG 439 ne fournit qu'une évaluation de l'irritation ; la corrosivité (TG 430, TG 431), la sensibilisation (série TG 442), la toxicité systémique et la phototoxicité n'entrent pas dans le champ d'application de cette norme. De plus, les modèles RhE ne reflètent ni l'épaisseur totale de la peau humaine (y compris le derme), ni les réactions systémiques dans leur intégralité. Les résultats doivent être interprétés en tenant compte des propriétés physico-chimiques de la substance et d'autres données toxicologiques.

Chez NanoTest, nous réalisons les essais in vitro d'irritation cutanée conformément à la ligne directrice 439 de l'OCDE, dans le cadre de notre infrastructure de laboratoire accréditée et de notre système de gestion de la qualité, en faisant preuve de rigueur scientifique.

Pour toute information concernant la planification d'une stratégie d'essais séquentielle, le choix du modèle RhE, la stratégie d'application et de mesure, les conditions de réception des échantillons, le calendrier des essais et les procédures de rapport pour vostests d’irritation cutanée in vitro conformément à la ligne directrice 439 de l’OCDE, n’hésitez pas à contacter NanoTest.

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