EP 2.6.1

EP 2.6.1, Farmacopea europea (ph. Eur.) La sezione 2.6 (test biologici) contiene il metodo generale "Sterilità", i. H "Sterilità". La sezione definisce i metodi di riferimento per rilevare i microrganismi viventi in prodotti farmaceutici che devono essere offerti sterili.

Armonizzazione e norme pertinenti: questa sezione è armonizzata con USP <71> (test di sterilità) e JP 4.06; I principi dei metodi, i mezzi di coltura e le regole di valutazione sono in gran parte identici. Il test di sterilità dei dispositivi medici viene trattato in ISO 11737-2 e in connessione con la convalida della sterilizzazione; EP 2.6.1 serve in particolare come base per il test di rilascio di routine di prodotti farmaceutici. A seconda del tipo di prodotto e dei requisiti normativi, è necessario selezionare il telaio appropriato.

Principio di base

Il test di sterilità si basa sul determinare se ci sono microrganismi viventi in una certa quantità di prodotto. Il test E non prova che il prodotto sia sterile/forte; Piuttosto, valuta la probabilità di contaminazione sulla base di un piano e metodo di campionamento specifico. Pertanto, i risultati dovrebbero essere interpretati in relazione al controllo del processo di produzione, ai dati sul bioburden e alla convalida della sterilizzazione.

Metodi

EP 2.6.1 definisce due metodi di base:

Processo di filtrazione della membrana: il prodotto (o la sua soluzione) viene filtrato attraverso una membrana con una dimensione dei pori di 0,45 µm; I microrganismi vengono trattenuti nella membrana e la membrana viene trasferita in un mezzo nutritivo idoneo o il mezzo nutritivo viene fatto passare attraverso la membrana. Questo è il metodo preferito per prodotti liquidi trasparenti, prodotti solubili in acqua, corpi cavi e prodotti lavabili. Nel caso di prodotti contenenti antibiotici, consente anche la rimozione degli inibitori.
Metodo di inoculazione diretta: Il prodotto viene trasferito direttamente al mezzo nutritivo e incubato. viene utilizzato in prodotti in cui non è possibile la filtrazione a membrana (ad es. pomate, creme, alcune sospensioni).

Esistono linee guida aggiuntive per alcuni tipi di prodotti: prodotti oleosi, unguenti, creme, aerosol e prodotti per inalazione, dispositivi medici, sistemi transdermici, gas, ecc. In questi prodotti, preparazione del campione (scioglimento, emulsionamento, neutralizzazione, lavaggio) per l'applicabilità del Il metodo è fondamentale.

Media culturali

Brodo trittico di soia (TSB) / brodo digesto di caseina di soia: per batteri aerobi e funghi; Incubare a 30-35°C
Sabouraud Dextrose Bouillon (SDB) / Sabouraud Medium Liquid: per funghi e lieviti; diventa a 20-25 °C incubato
Se necessario, per anaerobio prodotti mezzi nutritivi adatti (ad es. mezzo tioglicolato) e condizioni utilizzate
Le prestazioni del mezzo nutritivo devono essere confermate da un test di promozione della crescita

Incubazione

Nel metodo di filtrazione a membrana: di solito 14 giorni; TSB a 30-35°C, SDB a 20-25°C
Nel metodo di inculazione diretta: di solito 14 giorni; Tuttavia, questo può variare a seconda delle caratteristiche e delle esigenze del prodotto della monografia
Un'ispezione visiva regolare viene eseguita durante l'incubazione; La foschia è considerata un indicatore di crescita

Metodo di idoneità

La validità del test di sterilità dipende dalla rilevamento dell'idoneità del metodo. Un componente essenziale è il test batteriostasi/fungistasi:

Deve essere dimostrato che il prodotto non inibisce la crescita di un piccolo numero (di solito ≤100 CFU) di microrganismi sul mezzo nutritivo selezionato
I microrganismi di prova sono: Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa, Sporogenes di Clostridium, Candida albicans, Aspergillus brasiliensis
Se si osserva un'inibizione, la procedura deve essere corretta mediante adeguata neutralizzazione (ad es. penicillinasi, beta-lattamasi), diluizione o purge

Controlli e valutazione

Controllo negativo: monitoraggio della sterilità del mezzo nutritivo e dell'ambiente di prova
Controllo positivo: conferma della funzionalità del sistema di prova (di solito in relazione all'idoneità del metodo)
Valutazione: Se non c'è crescita alla fine dell'incubazione, il prodotto ha il test di sterilità passato; Se c'è crescita, ha fallito e il microrganismo cresciuto deve essere identificato
Se necessario, si applicano i regolamenti della farmacopea per una ripetizione del test (riprova); Tuttavia, ripetere il test non sostituisce l'analisi della causa principale

I parametri di base riportati nello studio sono:

Descrizione del prodotto, requisiti della monografia e piano di campionamento
Metodo di test di sterilità (filtrazione della membrana o inoculazione diretta)
Usato mezzi infermieristici (TSB, SDB o altri) e condizioni di incubazione (temperatura, durata)
Quantità di campione e metodo di preparazione del campione
Risultati del metodo di idoneità/batteriostasi test fungistasi
Utilizzato microrganismi di prova e dati di recupero
Controlli negativi e positivi e i loro risultati
Dopo l'incubazione valutazione visiva e rilevamento della crescita germinale
In caso di crescita risultati
Risultato del test: Test di sterilità superato/fallito
Usato Ph. Eur. ed edizione di riferimento della monografia
Dati su incertezza di misura e ripetibilità

Perché viene eseguito?

EP 2.6.1 è utilizzato per le seguenti finalità scientifiche e regolamentari:

Conformità ai farmaci: Attuazione del test di sterilità legale per i prodotti secondo le corrispondenti monografie e idoneità alla commercializzazione sul mercato dell'UE
GARANZIA DI SICUREZZA DEI PAZIENTI: Valutazione della contaminazione con microrganismi viventi in preparati per iniezioni sterili, preparati per gli occhi, soluzioni per infusione e dispositivi medici
Rilascio del prodotto: Valutazione della sterilità dei lotti di produzione prima dell'immissione sul mercato
Integrazione nella convalida della sterilizzazione: Rilevamento dell'efficacia dei processi di sterilizzazione (in combinazione con ISO 11737-2, ISO 11135, ISO 11137, ISO 17665, ISO 14937)
Materiale grezzo e controllo di processo: Monitoraggio delle condizioni microbiologiche di materie prime, intermedi e componenti di imballaggio
Controllo e test di qualità: Prova della conformità della farmacopea e dell'igiene della produzione nelle ispezioni ufficiali
Analisi del caso: contributo alla determinazione della fonte di contaminazione in caso di fallimento della sterilità
Approssimativamente prova: contributo alla garanzia olistica del prodotto in combinazione con i dati bioburden (ISO 11737-1), endotossine (ISO 11737-3, EP 2.6.14), validazione di sterilizzazione e confezionamento (ISO 11607)

EP 2.6.1 Non dimostra la sterilità del prodotto; La sterilità è un'espressione di probabilità e viene valutata insieme al livello sterilità (SAL). Per i prodotti farmaceutici, i test di sterilità dovrebbero essere eseguiti insieme al controllo del processo di produzione e alla convalida della sterilizzazione.

Come NanoTest, eseguiamo i test di sterilità in conformità con EP 2.6.1 come parte della nostra infrastruttura di laboratorio accreditata e il nostro sistema di gestione della qualità con cura scientifica.

Per informazioni sulla selezione del metodo, l'idoneità del metodo, la preparazione del campione, le condizioni di incubazione, la pianificazione dei test e i processi di segnalazione per i test di sterilità in EP 2.6.1, contattare NanoTest.

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