EN ISO 10993-4

ISO 10993-4 è uno standard pubblicato dall'International Organization for Standardization (ISO) e adottato dal Comitato europeo per la standardizzazione (CEN) dal titolo "Valutazione biologica dei dispositivi medici - Parte 4: Selezione dei test per le interazioni con sangue”, i. H "Valutazione biologica dei dispositivi medici - Parte 4: Selezione dei test per le interazioni del sangue". È comunemente indicato come standard di emocompatibilità.

Stato normativo e nota di rilascio: L'attuale testo di base dello standard è ISO 10993-4:2017 (quarta edizione) ed era a livello europeo come EN ISO 10993-4:2017 accettato. Poiché la modifica dello standard è attualmente in fase di elaborazione, deve essere La versione consolidata valida così come lo status dell'acquisizione nazionale. La norma è stata riconosciuta come norma armonizzata nell'ambito del regolamento sui dispositivi medici (MDR 2017/745); Lo stato di riconoscimento e la portata della FDA (soprattutto per quanto riguarda alcune sezioni) dovrebbero essere esaminati prima della presentazione della domanda.

La caratteristica essenziale della norma è che non richiede procedure di test specifiche, ma uno invece frame e una matrice di selezione Fornisce per quali categorie di test a seconda Tipo e durata del contatto con il sangue deve essere selezionato. Pertanto, ISO 10993-4 non è uno "standard di procedura" ma a Standard di selezione del test; Le procedure specifiche da applicare (ad es. ELISA, citometria a flusso, REM, ciclo di flusso) sono determinate sulla base della letteratura pertinente e degli studi di convalida.

Categorie di dispositivi

Lo standard classifica i dispositivi che entrano in contatto con il sangue in base alle loro caratteristiche di contatto:

Percorso del sangue indiretto (percorso del sangue indiretto): Dispositivi che non entrano direttamente in contatto con il sangue ma attraverso i quali fluiscono sangue o emoderivati (ad es. insiemi di somministrazione della soluzione, set di trasferimento)
Via diretta del sangue - Contatto indiretto: Dispositivi che entrano in contatto con il sangue ma dove il sangue non circola (ad es. cannule, cateteri, tubi di raccolta del sangue)
Via diretta del sangue - Contatto con sangue circolante: Dispositivi in cui il sangue circola continuamente (ad es. cicli extracorporei, dispositivi di emodialisi, pompe ematiche)
Dispositivi per impianti: Dispositivi impiantati che entrano in contatto con il sangue (ad es. innesti vascolari, valvole cardiache, stent, sistemi di supporto ventricolare)

Tempo di contatto

Limitato (limitato): Tempo di contatto inferiore a 24 ore
Lungo termine (prolungato): tempo di contatto tra 24 ore e 30 giorni
Permanente (permanente): Durata del contatto superiore a 30 giorni

Categorie del test di emocompatibilità

Lo standard definisce cinque categorie di test principali ed elenca gli endpoint tipici per ciascuna categoria:

1. Trombosi

Formazione e accumulo di trombi (valutazione macroscopica e utilizzando SEM)
Accumulo di fibrina(geno) e livelli di fibrinopeptide A
Adesione piastrinica e formazione di aggregati
Valutazione del trombo in anello di flusso o modelli animali

2. Coagulazione (coagulazione)

Tempo di protrombina (PT), tempo di tromboplastina parziale attivata (APTT)
Livello di fibrinogeno, tempo di trombina
Complesso di antitrombina della trombina (TAT), frammento di protrombina F1+2
Altri marcatori di attivazione della coagulazione

3. Piastrine (piastrine)

Conta piastrinica e aggregazione piastrinica
Marker di attivazione piastrinica (P-selectina/CD62P, β-tromboglobulina, PF4)
Attivazione dei trombociti fenotipici mediante citometria a flusso
Adesione e propagazione piastrinica (valutazione microscopica)

4. Ematologia (ematologia)

Emocromo completo (eritrocita, leucocita e conta piastrinica, ematocrito, emoglobina)
Differenziazione dei leucociti
Indicatori di emolisi (emoglobina plasmatica libera, aptoglobina; possono anche essere valutati utilizzando lo standard di emolisi ASTM F756)

5. Sistema di complemento (sistema di complemento)

C3a, specchio C5A
SC5B-9 (complesso di complemento terminale, TCC)
Altri marcatori di attivazione del complemento come CH50, BB, IC3B

Ambienti di prova

Test in vitro: contatto diretto del dispositivo o del materiale con il sangue; Questo è l'approccio preferito. Le condizioni di prova (sorgente di sangue, anticoagulante, temperatura, tempo di contatto, rapporto superficie-volume) dovrebbero essere scelte per riflettere l'uso clinico.
Modelli ex vivo: Flusso sanguigno controllato attraverso il dispositivo utilizzando sistemi di flusso; Consente la valutazione dei dispositivi che entrano in contatto con il sangue circolante in particolare.
Modelli in vivo: Valutazione dell'interazione del dispositivo con il sangue in modelli animali (ad es. maiale, cane, pecora); Può essere necessario per impianti e dispositivi extracorporei.

Nota metodologica importante: nei test di emocompatibilità - a differenza di altri test biologici - Il contatto diretto con il sangue invece di un estratto è solitamente più adatto, poiché l'obiettivo è valutare l'interazione tra superficie e sangue. In alcuni test, tuttavia, può essere utilizzata la produzione di un estratto (ISO 10993-12). La fonte di sangue (preferibilmente sangue umano; quando si utilizza il sangue animale, devono essere indicate le differenze di specie), il tipo di anticoagulante (eparina, citrato) e il tempo del test hanno un effetto diretto sui risultati.

I parametri di base riportati nello studio sono:

La categoria del dispositivo e il tempo di contatto; Motivazione della matrice di selezione del test
Le categorie di test selezionate e specifici endpoint
Fonte di sangue (umano/animale), Anticoagulante e condizioni di preparazione del sangue
Condizioni di prova: rapporto area/volume, tempo di contatto, temperatura, velocità di flusso (per modelli di flusso)
Usato metodi analitici e intervalli di riferimento
Per ogni estremità risultati quantitativi e confronto con il gruppo di controllo
Controlli positivi e negativi e criteri di validità
Risultato: emocompatibile/non emocompatibile rating e giustificazione
Dati su incertezza di misura e ripetibilità

Qual è il test fatto?

La EN ISO 10993-4 viene eseguita per le seguenti finalità scientifiche e normative:

Valutare la sicurezza del paziente: Determinazione del potenziale dei prodotti che entrano in contatto con il sangue, suscitare effetti indesiderati come trombosi, emolisi, attivazione piastrinica, coagulazione e attivazione del complemento
Conformità MDR: Fornitura dei dati necessari per la valutazione della sicurezza biologica ai sensi del regolamento sui dispositivi medici (2017/745)
Gestione del rischio Valutazione e riduzione dei rischi tromboembolici ed emolitici nei prodotti che toccano il sangue
Sviluppo del materiale e del progetto: Valutazione dell'influenza delle proprietà superficiali (rugosità, idrofilia, rivestimenti) e selezione dei materiali sull'emocompatibilità
Standardizzazione della selezione del test: Motivazione scientifica delle serie di test idonee in base alla categoria del prodotto e durata del contatto
Supporto con documenti di registrazione: Utilizzo come parte del fascicolo di biocompatibilità per le domande FDA, secondo l'UE-MDR e altre autorità di licenza
Protezione animale (3R): uso prioritario di modelli in vitro ed ex vivo, se del caso
Approssimativamente a prova: Caratterizzazione chimica (ISO 10993-18), citotossicità (ISO 10993-5), effetto irritante (ISO 10993-23), sensibilizzazione (ISO 10993-10) e altri dati sulla biocompatibilità contribuiscono alla valutazione olistica del prodotto

La sola EN ISO 10993-4 non copre l'intero profilo di biocompatibilità del prodotto; Inoltre, i test di emocompatibilità potrebbero non riflettere completamente le condizioni di utilizzo cliniche del prodotto. I risultati dovrebbero essere interpretati in connessione con caratterizzazione chimica, altri test biologici, progettazione del prodotto e dati clinici.

Come nano test, effettuiamo valutazioni di emocompatibilità in conformità alla EN ISO 10993-4 nell'ambito della nostra infrastruttura di laboratorio accreditata e del nostro sistema di gestione della qualità con cura scientifica. Il nostro ambito di servizi include quanto segue:

Creazione di una strategia di test e di un protocollo

Determinazione della categoria del dispositivo medico (contatto di sangue indiretto, contatto diretto del sangue, impiantabile) e durata del contatto (limitato, a lungo termine, permanente)
Creazione e giustificazione del set di test appropriato secondo la matrice di selezione del test ISO 10993-4
Valutazione della presente caratterizzazione chimica (ISO 10993-18) e dati bibliografici
Fissazione della fonte di sangue (preferibilmente sangue umano), strategia anticoagulante e preparazione del sangue
Progettazione delle condizioni di prova (rapporto di volume della superficie, tempo di contatto, temperatura, condizioni di flusso) in modo da riflettere l'uso clinico
Pianificazione di controlli positivi e negativi; Rispetto dei requisiti etici e normativi

Per informazioni sulle strategie di test, la selezione dei kit di test, la pianificazione della fonte di sangue e l'anticoagulante, le condizioni per l'accettazione del campione, il programma di test e i processi di segnalazione nel contesto delle loro valutazioni di emocompatibilità secondo EN ISO 10993-4 Siete invitati a contattare Nano-test.

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