EP 2.6.1

EP 2.6.1, Farmacopea Europea (Ph. Eur.) La Sección 2.6 (Exámenes Biológicos) contiene el método general "Esterilidad", D. marido "Esterilidad". La sección define métodos de referencia para detectar microorganismos vivos en Productos farmacéuticos que se deben ofrecer estériles.

Armonización y normas pertinentes: Esta sección es con USP <71> (pruebas de esterilidad) y JP 4.06 armonizado; Los principios de los métodos, los medios de cultivo y las reglas de evaluación son en gran medida idénticos. La prueba de esterilidad para dispositivos médicos se realiza en el marco de ISO 11737-2 y tratados en relación con la validación de esterilización; El documento EP 2.6.1 sirve en particular como base para el Comprobación de liberación de rutina de productos farmacéuticos. Dependiendo del tipo de producto y de los requisitos reglamentarios, se debe seleccionar el marco apropiado.

Principio fundamental

La prueba de esterilidad se basa en determinar si existen microorganismos vivos en una cierta cantidad de producto. La prueba E no prueba que el producto sea estéril /fuerte ; Más bien, evalúa la probabilidad de contaminación basada en un plan y método de muestreo específicos. Por lo tanto, los resultados deben interpretarse en relación con el control de procesos de producción, datos de carga biológica y validación de esterilización.

Métodos

EP 2.6.1 define dos métodos básicos:

Proceso de filtración de membrana: El producto (o su solución) se filtra a través de una membrana con un tamaño de poro de 0,45 µm; Los microorganismos se retienen en la membrana y la membrana se transfiere a un medio nutriente adecuado o el medio nutriente pasa a través de la membrana. Este es el método preferido para productos líquidos claros, productos solubles en agua, cuerpos huecos y productos lavables. En el caso de productos que contienen antibióticos, también permite la eliminación de inhibidores.
Método de inoculación directa: El producto se transfiere directamente al medio nutritivo y se incuba. se utiliza en productos donde no es posible filtrar por membrana (por ejemplo, ungüentos, cremas, ciertas suspensiones).

Existen directrices adicionales para ciertos tipos de productos: productos aceitosos, ungüentos, cremas, productos de aerosol e inhalación, dispositivos médicos, sistemas transdérmicos, gases, etc. En estos productos, preparación de muestras (disolviendo, emulsionante, neutralizante, lavado) para la aplicabilidad del método es crucial.

Medios de cultivo

Caldo tríptico de soja (TSB) / caldo de digestión de caseína de soja: para bacterias y hongos aeróbicos; Incubar a 30-35°C
Sabouraud Dextrose Bouillon (SDB) / Medio líquido Sabouraud: para setas y levaduras; se convierte en 20-25 °C incubado
Si es necesario, se utilizan medios de nutrientes adecuados (por ejemplo, medio tioglicolato) y condiciones para productos anarobe
El rendimiento de los medios de nutrientes debe ser confirmado por una prueba de promoción de crecimiento

Incubación

En el método de filtración por membrana: generalmente 14 días; TSB a 30-35°C, SDB a 20-25°C
En el método de inculación directa: por lo general 14 días; Sin embargo, esto puede variar dependiendo de las características y requisitos del producto de la monografía
Se realiza una inspección visual regular durante la incubación; La neblina se considera un indicador de crecimiento

Idoneidad del método

La validez de la prueba de esterilidad depende de la detección de la idoneidad del método. Un componente esencial es la prueba de bacteriostasis/fungistasa:

Debe probarse que el producto no inhibe el crecimiento de un pequeño número (generalmente ≤100 UFC) de microorganismos en el medio nutriente seleccionado
Típicamente utilizados como microorganismos de prueba son: Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Pseudomonas aeruginosa, Clostridium sporogenes, Candida albicans, Aspergillus brasiliensis
Si se observa una inhibición, el procedimiento debe corregirse mediante neutralización (por ejemplo, penicilinasa, beta-lactamasa), dilución o purga

Controles y evaluación

Control negativo: Monitorización de la esterilidad del medio nutriente y del entorno de prueba
Control positivo: Confirmación de la funcionalidad del sistema de prueba (generalmente en relación con la idoneidad del método)
Evaluación: Si no hay crecimiento al final de la incubación, el producto tiene la prueba de esterilidad pasada; Si hay crecimiento, tiene fracasado y el microorganismo crecido debe ser identificado
Si es necesario, se aplican las regulaciones de la farmacopea para una repetición de la prueba (re-test); Sin embargo, repetir la prueba no reemplaza el análisis de la causa raíz

Los parámetros básicos reportados en el estudio son:

Descripción del producto, requisitos de monografía y plan de muestreo
Se utiliza Método de prueba de esterilidad (filtración de membrana o inoculación directa)
Usado Medios de enfermería (TSB, SDB u otros) y Condiciones de incubación (temperatura, duración)
Catidad de muestra y método de preparación de muestras
Resultados de la idoneidad del método / Pruebas de fungistas de bacteriostasis
Usados microorganismos de prueba y datos de recuperación
Controles negativos y positivos y sus resultados
Después de la incubación evaluación visual y detección del crecimiento germinal
En el caso de crecimiento Identificación Resultados
Resultado de la prueba: Prueba de esterilidad aprobada / fallida
Ph. usado EUR. y edición de referencia monográfica
Datos sobre incertidumbre de medición y repetibilidad

¿Por qué se lleva a cabo?

El documento EP 2.6.1 se utiliza para los siguientes fines científicos y regulatorios:

Cumplimiento de medicamentos: Implementación de la prueba legal de esterilidad para productos de acuerdo con las monografías correspondientes y idoneidad para la comercialización en el mercado de la UE
Garantía de seguridad del paciente: Evaluación de la contaminación con microorganismos vivos en preparaciones de inyección estéril, preparaciones oculares, soluciones de infusión y dispositivos médicos
Lanzamiento del producto: Evaluación de la esterilidad de los lotes de producción antes de su comercialización
Integración en la validación de esterilización: Detección de la efectividad de los procesos de esterilización (junto con ISO 11737-2, ISO 11135, ISO 11137, ISO 17665, ISO 14937)
Materia prima y control de procesos: Monitorización de la condición microbiológica de materias primas, productos intermedios y componentes de envasado
Control de calidad y pruebas: Prueba de conformidad farmacopoeia e higiene de la producción en las inspecciones oficiales
Análisis de casos: Contribución para determinar la fuente de contaminación en caso de fallo de esterilidad
Prueba aproximadamente: Contribución a la garantía holística del producto en combinación con datos de BioBurden (ISO 11737-1), endotoxinas (ISO 11737-3, EP 2.6.14), esterilización Validación y embalaje (ISO 11607)

EP 2.6.1 No prueba la esterilidad del producto; La esterilidad es una expresión de probabilidad y se evalúa junto con el nivel de esterilidad (SAL). Para los productos farmacéuticos, las pruebas de esterilidad deben realizarse junto con el control del proceso de fabricación y la validación de esterilización.

Como nanotest, realizamos las pruebas de esterilidad de acuerdo con EP 2.6.1 como parte de nuestra infraestructura de laboratorio acreditada y nuestro sistema de gestión de calidad con atención científica.

Para obtener información sobre la selección de métodos, la idoneidad del método, la preparación de muestras, las condiciones de incubación, el cronograma de pruebas y los procesos de informes para sus pruebas de esterilidad en el documento EP 2.6.1, comuníquese con NanoTest.

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