USP 85

USP <85>

USP <85>, Farmacopea de los Estados Unidos (USP) – Esta es la sección general de la "Prueba de endotoxina bacteriana" publicado "Pruebas de endotoxinas bacterianas". La sección describe los procedimientos de prueba con Lisado de amobocitos de limulo (LAL) para determinar Lipopolisacáridos (endotoxinas)que provienen de la pared celular de las bacterias gramnegativas.

Armonización y normas pertinentes: Armonizado con UPS <85>, EP 2.6.14 (Farmacopea Europea) y JP 4.01 (libro medicinal japonés) (texto común de las tres farmacopeas). Los principios del método, los requisitos de validación y los criterios de aceptación son en gran medida idénticos. Las referencias fuera de la farmacopea incluyen ISO 10993-11 (evaluación de la pirogenicidad relacionada con el material en dispositivos médicos) USP <161> (conjuntos de contactos de sangre/disolvente); Si se requiere una determinación de endotoxina para los dispositivos médicos, esto se llevará a cabo junto con estas normas.

Principio fundamental

LAL es un lisado obtenido de los amobocitos de los dardos del dardo (Limulus polifemus o tachypleus tridentatus), que es una cascada de coagulación desencadenadores enzimáticos. Dependiendo del método, esta cascada se mide en forma de formación de gel, cambio de turbidez o formación de color. La precisión de la prueba está determinada por la sensibilidad especificada del lisado (λ, EU/ml), la calibración de endotoxina estándar (CSE/RSE) y el control de interferencia garantizado.

Métodos

Die USP <85> definiert drei grundlegende Methodengruppen:

• Método de gel-clot: Prueba de límite y método semicuantitativo; Evaluación visual de la formación de gel en una mezcla de endotoxinas de lisado. Este es el método más utilizado como método de referencia.
• Método turbidimétrico: Medición fotométrica del cambio de turbidez debido a la coagulación; Modo cinético o de punto final
• Método cromogénico: Medición fotométrica del producto coloreado creado por degradación de un sustrato sintético por la cascada de coagulación; Modo cinético o de punto final

Cálculos y términos importantes

• Límite de endotoxina (EL): Valor límite de monografía (p. ej., fórmula K/M para productos parenterales; K = dosis umbral pirogénica, M = dosis máxima por hora por kg de peso corporal personas)
• Dilución válida máxima (dilución válida máxima, MVD): MVD = (El × Concentración de la muestra) / λ
• λ (lambda): Sensibilidad especificada del lisado (EU/ml)
• CSE (endotoxina estándar de control): Contra el estándar de control de referencia de endotoxina USP (RSE) Estándar calibrado para endotoxinas
• PPC (Control positivo del producto): Confirmación de la recuperación de una cantidad conocida de endotoxina en la muestra; Evaluación de interferencia (inhibición/potenciación)
• Prueba de interferencia (prueba de factores de interferencia): Debe realizarse para cada producto en la fase de validación; Eliminación de la interferencia mediante la dilución apropiada o el ajuste del método

Los parámetros básicos reportados en el estudio son:

• Descripción del producto, Entero Endotox (EL) y su base (monografía/fórmula)
• Usado Método LAL (Agregado en Gel, Turbidimétrico, Cromógeno) y Modo
• Lote de Lysat, Valor λ e Información del fabricante
• Calibración CSE/RSE y datos de validación
• MVD y diluciones aplicadas
• Resultados de la prueba de interferencia (recuperación de PPC, rango de aceptación)
• Resultados del control negativo y positivo
• Resultado de la muestra y Comparación con EL
• Salida USP-NF usada y revisión de capítulos
• Datos de incertidumbre de medición y repetibilidad

¿Para qué es esto?

USP <85> wird für die folgenden wissenschaftlichen und regulatorischen Zwecke angewendet:

• Seguridad de los productos parentales: Detección de que la contaminación por endotoxinas en preparaciones de inyección, soluciones de infusión, colirios y otros productos farmacéuticos está dentro de los límites
• Cumplimiento de la farmacopea: Implementación de la prueba prescrita para los productos para los que se proporciona una prueba de endotoxina en las monografías USP-NF y una declaración de conformidad para la comercialización en el mercado estadounidense
• Evaluación de dispositivos médicos: Evaluación de la pirogenidad y endotoxinas relacionadas con el material para los productos que entran en contacto con la sangre o las soluciones (por ejemplo, conjuntos de infusión, catéteres, implantes) (de acuerdo con ISO 10993-11 y USP <161>)
• Materia prima y control de procesos: Monitorización de carga de endotoxinas de agua (agua purificada, agua para inyección), materias primas y componentes de envasado en la fabricación farmacéutica
• Esterilización y validación de procesos: Demostrar la eficacia de los procesos de depirogenización
• Control de calidad y liberación: Producción de muchas endotoxinas antes del lanzamiento al mercado
• Inspecciones y aplicaciones de la FDA: Provisión de datos de endotoxinas en documentos 510(k), NDA/ANDA, IND y BLA; Prueba de conformidad con los compendios durante las inspecciones
• Protección animal (3R): Uso de la prueba LAL como alternativa a la prueba de pirógenos en conejos (USP <151>)
• Evidencia aproximada: Contribución a la evaluación de seguridad holística del producto en relación con datos sobre esterilidad, biocompatibilidad y pirogenicidad

USP <85> Detecta solo endotoxinas bacterianas; Pirogenicidad relacionada con el material (pirógenos no endotóxicos) y Contaminación microbiana No se encuentre dentro del alcance de esta prueba y debe ser evaluado usando los métodos apropiados (USP <151> prueba de pirógenos de conejo, USP <71> prueba de esterilidad, prueba de activación de monocitos).

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