ISO 22718

ISO 22718

ISO 22718 ist eine von der Internationalen Organisation für Normung (ISO) veröffentlichte standardisierte mikrobiologische Analysemethode zum Nachweis von Staphylococcus aureus in Kosmetikprodukten. Der vollständige Titel der Norm lautet „Cosmetics – Microbiology – Detection of Staphylococcus aureus“, d. h. „Kosmetische Mittel – Mikrobiologie – Nachweis von Staphylococcus aureus“.

Aktuelle Fassung: Der Grundtext der ISO 22718:2015 ist zusammen mit Änderung 1 (ISO 22718:2015/Amd 1:2022) in Kraft. Von den europäischen Normungsorganisationen wurden in den Jahren 2022–2023 konsolidierte Fassungen (z. B. DIN EN ISO 22718:2023-01, ÖNORM EN ISO 22718:2023 03 01) veröffentlicht. Daher ist es von entscheidender Bedeutung, dass bei den Arbeiten die aktuelle konsolidierte Fassung zugrunde gelegt wird[reference:0][reference:1].

Staphylococcus aureus ist ein grampositives, kokkenförmiges, katalase-positives und koagulase-positives Bakterium. Sein Vorkommen in Kosmetikprodukten stellt insbesondere bei Produkten, die mit Haut und Schleimhäuten in Kontakt kommen, ein Risiko für die Verbrauchergesundheit dar. Die Norm ISO 22718 wird zusammen mit ISO 17516 (Kosmetika – Mikrobiologie – Mikrobiologische Grenzwerte) angewendet; ISO 17516 legt fest, dass S. aureus in Kosmetikprodukten nicht vorhanden sein darf (Abwesenheit in einer bestimmten Probenmenge).

ISO 22718 bildet zusammen mit anderen Normen zur mikrobiologischen Bewertung von Kosmetika eine Normenreihe:

• ISO 21149 – Zählung und Nachweis aerober mesophiler Bakterien
• ISO 21150 – Nachweis von Candida albicans
• ISO 22717 – Nachweis von Pseudomonas aeruginosa
• ISO 22718 – Nachweis von Staphylococcus aureus
• ISO 21527 – Zählung von Hefen und Schimmelpilzen
• ISO 11930 – Prüfung der konservierenden Wirksamkeit (Challenge-Test)

Das Grundprinzip der Norm besteht aus den Phasen Anreicherung und Verifizierung:

1. Anreicherung (Enrichment)

• Die Probe wird in einem geeigneten Verdünnungsmittel homogenisiert und in ein nicht-selektives Flüssignährmedium (Enrichment-Bouillon) inokuliert.
• Die Inkubation erfolgt in der Regel unter aeroben Bedingungen bei 37 °C ± 2 °C für 24–48 Stunden.
• Die nicht-selektive Anreicherung ermöglicht die Vermehrung potenzieller S. aureus-Zellen (und anderer Mikroorganismen); anschließend folgt die selektive Isolationsphase[reference:2].

2. Isolierung auf selektivem Agar

• Aus der Anreicherungsbrühe wird auf ein selektives Festnährmedium (z. B. Baird-Parker-Agar, Mannitol-Salz-Agar, chromogenes Agar) überführt.
• Die Inkubation dauert 24–48 Stunden bei 37 °C ± 2 °C.
• S. aureus weist eine typische Koloniemorphologie auf (z. B. auf Baird-Parker-Agar schwarz, glänzend, mit klarem Halo umgeben; auf chromogenem Agar charakteristische Färbung)[Reference:3].

3. Bestätigung (Confirmation)

• Verdächtige Kolonien werden mittels Koagulase-Test, Katalase-Test und gegebenenfalls biochemischer Tests (z. B. DNase, Mannitol-Fermentation) bestätigt.
• Alternativ können molekulare Methoden (PCR, qPCR, MALDI-TOF-MS) verwendet werden.
• Koagulase-positive Isolate mit typischer Morphologie werden als S. aureus-positiv bewertet.

Die Validierung des Verfahrens erfolgt im Rahmen von ISO 21148 (Kosmetika – Mikrobiologie – Allgemeine Anleitungen); der Einfluss der Produktmatrix (Konservierungsstoffe, pH-Wert, Tenside) auf die Anreicherung, Isolierung und Bestätigung muss bewertet werden.

Die in der Studie berichteten grundlegenden Parameter sind folgende:

• • Nachweisergebnis (vorhanden/nicht vorhanden) und entsprechende Probenmenge (in der Regel 1 g oder 1 mL)
  • Verwendetes Verdünnungsmittel, Anreicherungsbouillon und selektiver Agar
  • Inkubationstemperatur und Dauer (für jede Phase)
  • Morphologische Merkmale

der verdächtigen Kolonien

• Bestätigungstests (Koagulase, Katalase, biochemisch, molekular) und deren Ergebnisse
• Vergleich mit den Grenzwerten gemäß ISO 17516
• Bedingungen für die Probenvorbereitung (Homogenisierung, Neutralisierung)
• Angaben zur Methodenvalidierung (gemäß ISO 21148)
• Positive und negative Kontrollen
• Daten zur Messunsicherheit und Wiederholbarkeit

Warum wird sie durchgeführt?

Die Prüfung nach ISO 22718 wird zu folgenden wissenschaftlichen, technischen und regulatorischen Zwecken durchgeführt:

• Gewährleistung der Verbrauchersicherheit: Nachweis und Prävention einer S. aureus-Kontamination in Kosmetikprodukten
• Nachweis der Konformität mit den Grenzwerten der ISO 17516: Bewertung der Anforderung, dass S. aureus in einer bestimmten Probenmenge nicht nachweisbar sein darf
• Qualitätskontrolle: Überwachung der mikrobiologischen Konsistenz zwischen den Produktionschargen
• Rohstoffkontrolle: Bewertung der mikrobiologischen Qualität von kosmetischen Rohstoffen
• Nachweis der Wirksamkeit des Konservierungssystems: Bereitstellung von Basisdaten für die Bewertung der Wirksamkeit von Konservierungsstoffen (ISO 11930)
• Stabilitäts- und Haltbarkeitsbewertung: Überwachung des Kontaminationsrisikos durch S. aureus während der Lagerung
• Unterstützung bei der Erstellung von Zulassungsunterlagen: Bereitstellung von Daten für den Kosmetik-Sicherheitsbericht (CPSR) im Rahmen der EU-Kosmetikverordnung (EG 1223/2009) und der entsprechenden nationalen Vorschriften
• GMP-Konformität: Nachweis der Produktionshygiene gemäß ISO 22716 (Kosmetik-GMP)
• Ansatz der Beweiskraft: Beitrag zur ganzheitlichen Bewertung des Produkts in Verbindung mit anderen mikrobiologischen Tests, Tests zur Wirksamkeit von Konservierungsstoffen und Stabilitätsdaten

ISO 22718 allein garantiert nicht die vollständige Produktsicherheit.
Die Gesamtkeimzahl aerober mesophiler Bakterien (ISO 21149), der Nachweis weiterer Krankheitserreger (ISO 21150, ISO 22717) sowie die Prüfung der Konservierungswirksamkeit (ISO 11930) müssen anhand separater Normen bewertet werden. Die Ergebnisse sollten im Zusammenhang mit der Produktformulierung, den Produktionsbedingungen sowie den Verpackungs- und Lagerbedingungen interpretiert werden.

Als Nano-Test führen wir S. aureus-Nachweisuntersuchungen gemäß ISO 22718 im Rahmen unserer akkreditierten Laborinfrastruktur und unseres Qualitätsmanagementsystems mit wissenschaftlicher Sorgfalt durch. Unser Leistungsumfang umfasst Folgendes:

Methodenauswahl und -validierung

• Auswahl des geeigneten Verdünnungsmittels, der Anreicherungsbrühe und des selektiven Agars entsprechend dem Produkttyp und den physikalisch-chemischen Eigenschaften
• Festlegung der Probenvorbereitungsstrategie (Homogenisierung, Neutralisierung)
• Methodenvalidierung (gemäß ISO 21148): Genauigkeit, Wiederholbarkeit und Interwiederholbarkeit
• Festlegung der Verifizierungsstrategie (biochemische Tests, molekulare Methoden)
• Bewertung und Berichterstattung der Messunsicherheit

Für Informationen zur Methoden- und Nährmedienauswahl, zu den Probenannahmebedingungen, zum Vergleich mit den Grenzwerten nach ISO 17516, zum Testzeitplan und zu den Berichtsprozessen im Rahmen Ihrer S. aureus-Nachweisuntersuchungen gemäß ISO 22718 können Sie sich gerne an Nano-Test wenden.