ISO 11737-3

ISO 11737-3

ISO 11737-3 ist der von der Internationalen Organisation für Normung (ISO) veröffentlichte Standard „Sterilisation von Produkten für die Gesundheitsfürsorge – Mikrobiologische Verfahren – Teil 3: Prüfung auf bakterielle Endotoxine“, d. h. „Sterilisation von Produkten für die Gesundheitsfürsorge – Mikrobiologische Verfahren – Teil 3: Bakterieller Endotoxintest“ ist. Die aktuelle Fassung ist ISO 11737-3:2023 (erste Ausgabe).

Hinweis zum regulatorischen Status: Die Norm definiert die Anforderungen an die Methodeneignung, routinemäßige Anwendung und Validierung der bakteriellen Endotoxintests bei der Bewertung der biologischen Sicherheit von Medizinprodukten und in Sterilisationsprozessen. Sie bietet einen Rahmen, der mit den Pharmakopöe-Methoden (USP <85>, EP 2.6.14, JP 4.01) kompatibel ist; ihr Schwerpunkt liegt jedoch speziell auf Medizinprodukten (bei pharmazeutischen Produkten gelten die Pharmakopöe-Texte). Sie wird in Verbindung mit der EU-Medizinprodukteverordnung (MDR 2017/745) und der Norm ISO 10993-11 angewendet. Die Norm ersetzt die in früheren Jahren veröffentlichte Fassung ISO 11737-3:2004; die aktuelle Fassung und der Stand der nationalen Umsetzung sollten vor der Einreichung eines Antrags bei den zuständigen Behörden überprüft werden.

Einordnung in die ISO-11737-Reihe

Die ISO-11737-Reihe behandelt in drei Teilen Methoden zur mikrobiologischen Bewertung von Medizinprodukten:

• ISO 11737-1: Bestimmung der Keimbelastung (Bioburden)
• ISO 11737-2: Sterilitätsprüfung
• ISO 11737-3: Prüfung auf bakterielle Endotoxine

Diese drei Teile bilden zusammen mit der Sterilisationsvalidierung (ISO 11135, ISO 11137, ISO 17665, ISO 14937) und der biologischen Bewertung (ISO-Reihe 10993) ein ganzheitliches System zur Gewährleistung von Sterilität und Sicherheit.

Grundprinzipien und Methoden

ISO 11737-3 basiert auf den Limulus-Amebocyte-Lysat (LAL)-Verfahren zur Bestimmung von Lipopolysacchariden (Endotoxinen), die aus der Zellwand gramnegativer Bakterien stammen. In Übereinstimmung mit den Pharmakopöe-Methoden werden drei grundlegende Methodengruppen definiert:

• Gel-Clot-Methode: Grenzwerttest und semiquantitative Methode; visuelle Beurteilung der Gelbildung in einer Lysat-Endotoxin-Mischung
• Turbidimetrisches Verfahren: Photometrische Messung der Trübungsänderung infolge der Koagulation (kinetisch oder Endpunkt)
• Chromogenes Verfahren: Photometrische Messung des farbigen Produkts, das durch den Abbau eines synthetischen Substrats durch die Koagulationskaskade entsteht (kinetisch oder Endpunkt)
• Alternative Methoden: Auf rekombinantem Faktor C (rFC) basierende Methoden und andere validierte Alternativen; soweit es die Norm zulässt, können diese mit entsprechender Validierung verwendet werden

Gerätespezifische Anforderungen und kritische Konzepte

• Probenvorbereitung: Ordnungsgemäße Extraktion des Geräts oder seiner Komponenten unter Berücksichtigung von Oberfläche, Masse und Kontaktbedingungen
• Endotoxingrenzwert (EL): Ein Grenzwert, der je nach Art und Dauer des Kontakts des Produkts festgelegt wird (in Übereinstimmung mit ISO 10993-11 und den entsprechenden behördlichen Leitlinien)
• Maximale gültige Verdünnung (MVD): MVD = (EL × Probenkonzentration) / λ
• λ (Lambda): Markierte Empfindlichkeit des Lysats (EU/ml)
• CSE (Control Standard Endotoxin): Gegen den Referenzstandard (RSE) kalibrierter Kontrollstandard
• Methodeneignung (Method Suitability): Bewertung des Interferenztests (Hemmung/Potenzierung) und der PPC-Wiederfindung; gerätespezifische Validierung
• PPC (Positive Product Control): Bestätigung der Wiederfindung anhand einer bekannten Endotoxinmenge in der Probe
• Routineprüfung und Überwachung: Routinemäßige Bewertung von Produktionschargen nach der Validierung
• Revalidierung: Neubewertung bei Änderungen am Gerätedesign, an den Materialien, am Herstellungsprozess oder an der Sterilisation

Die in der Studie berichteten grundlegenden Parameter sind folgende:

• Gerätebeschreibung, Art/Dauer des Kontakts und Endotoxin-Grenzwert (EL)
• Verwendete LAL-Methode und -Modus (Gel-Cluster, turbidimetrisch, chromogen; bei Verwendung einer alternativen Methode: Validierungszusammenfassung)
• Lysat-Charge, λ-Wert und Herstellerangaben
• CSE/RSE-Kalibrierung und Validierungsdaten
• MVD und angewandte Verdünnungen
• Ergebnisse der Methodeneignung/Interferenztests (PPC-Wiederfindung, Akzeptanzbereich)
• Ergebnisse der Negativ- und Positivkontrollen
• Ergebnisse der Routinetests und Vergleich mit EL
• Verwendete Version der ISO 11737-3 und entsprechende Pharmakopöe-Referenzen
• Daten zur Messunsicherheit und Wiederholbarkeit

Warum wird dies durchgeführt?

ISO 11737-3 wird für die folgenden wissenschaftlichen und regulatorischen Zwecke angewendet:

• Bewertung der Sicherheit von Medizinprodukten: Nachweis, dass die Endotoxinkontamination bei Produkten mit Kontakt zu Blut, Lösungen oder Gewebe (z. B. Infusionssets, Katheter, Implantate, Wundversorgungsprodukte) innerhalb der Grenzwerte liegt
• MDR-Konformität: Bereitstellung der erforderlichen Daten zur Gewährleistung der biologischen Sicherheit und Sterilität im Rahmen der EU-Medizinprodukteverordnung (2017/745)
• Integration mit ISO 10993-11: Durchführung von Endotoxintests als Bestandteil der Bewertung der materialbedingten Pyrogenität
• Integration in die Sterilisationsvalidierung: Überprüfung der Wirksamkeit von Depyrogenisierungsverfahren; Überwachung der Endotoxinfracht nach der Sterilisation
• Kontrolle des Produktionsprozesses: Überwachung der Endotoxinfracht von Rohstoffen, Zwischenprodukten und Endprodukten; Bewertung der Auswirkungen von Prozessänderungen
• Routinemäßige Qualitätskontrolle: Bewertung der Produktionschargen vor der Markteinführung
• Pharmakopöe-Konformität: Gegebenenfalls Anwendung von Methoden im Einklang mit USP <85>, EP 2.6.14 und JP 4.01 im Kontext medizinischer Geräte
• Einsatz alternativer Methoden: Einführung von rFC-basierten und anderen validierten Alternativen nach entsprechender Validierung; Reduzierung der Verwendung von tierischen LAL-Quellen
• Tierschutz (3R): Einsatz von LAL- und rFC-Methoden als Alternative zum Pyrogen-Test am Kaninchen
• Ansatz der Beweiskraft: Beitrag zur ganzheitlichen Bewertung des Produkts anhand von Daten zur Sterilität (ISO 11737-2), zur Keimbelastung (ISO 11737-1), zur Biokompatibilität (ISO 10993-Reihe) und zur Pyrogenität

ISO 11737-3 detektiert ausschließlich bakterielle Endotoxine; materialbedingte Pyrogenität (nicht-endotoxische Pyrogene) und mikrobielle Kontamination fallen nicht in den Geltungsbereich dieser Norm und müssen mit entsprechenden Methoden (Kaninchen-Pyrogentest, Monozyten-Aktivierungstest, Sterilitätstest) bewertet werden.

Als NanoTest führen wir die bakteriellen Endotoxin-Tests gemäß ISO 11737-3 im Rahmen unserer akkreditierten Laborinfrastruktur und unseres Qualitätsmanagementsystems mit wissenschaftlicher Sorgfalt durch.

Für Informationen zur Methodenauswahl, zur Methodeneignung und zum Vorversuch, zur MVD-Berechnung, zur Probenvorbereitung sowie zu den Routinemonitoring- und Berichtsprozessen im Zusammenhang mit Ihren bakteriellen Endotoxin-Tests gemäß ISO 11737-3 können Sie sich gerne an NanoTest wenden.