EN ISO 10993-12

EN ISO 10993-12

EN ISO 10993-12 ist eine von der Internationalen Organisation für Normung (ISO) veröffentlichte und vom Europäischen Komitee für Normung (CEN) übernommene Norm mit dem Titel „Biologische Bewertung von Medizinprodukten – Teil 12: Probenvorbereitung und Referenzmaterialien“, d. h. „Biologische Bewertung von Medizinprodukten – Teil 12: Probenvorbereitung und Referenzmaterialien“

Regulatorischer Status und Versionshinweis: Der Grundtext der Norm lautet ISO 10993-12:2021 (fünfte Ausgabe) und wurde auf europäischer Ebene als EN ISO 10993-12:2021 angenommen. Der Norm wurde Änderung 1 (A1:2025) hinzugefügt; die aktuelle konsolidierte Fassung lautet EN ISO 10993-12:2021+A1:2025; die deutsche Fassung wurde als DIN EN ISO 10993-12:2026-02 veröffentlicht[reference:0]. Die Norm wurde im Rahmen der EU-Medizinprodukteverordnung (MDR 2017/745) als harmonisierte Norm anerkannt (Anhang ZA)[reference:1]. Der Umfang der Anerkennung durch die FDA muss vor der Antragstellung überprüft werden.

Die Hauptfunktion der Norm besteht darin, Anforderungen und Leitlinien für die Auswahl, Aufbereitung und Extraktion von Proben sowie für die Auswahl von Referenzmaterialien für biologische Prüfungen festzulegen, die in anderen Teilen der ISO-10993-Reihe definiert sind[reference:2]. Mit anderen Worten: Die Norm bildet das Grundgerüst für die Probenvorbereitung bei biologischen Prüfungen; die Zuverlässigkeit und Wiederholbarkeit der Prüfergebnisse hängt in hohem Maße von der korrekten Anwendung dieser Norm ab.

Der Schwerpunkt der Überarbeitung von 2021: ISO 10993-12:2021 hat die Empfehlungen zur Probenvorbereitung für biologische Prüfungen deutlich von der Probenvorbereitung für chemische Prüfungen (die in ISO 10993-18:2020 ausführlich behandelt wird) deutlich von der Probenvorbereitung für chemische Prüfungen (die in ISO 10993-18:2020 ausführlich behandelt wird) abgrenzt[reference:3]. Diese Überarbeitung betont, dass angesichts der zunehmenden Komplexität von Produkten und Materialien die Probenvorbereitung produktspezifisch und unter Berücksichtigung der klinischen Anwendungsbedingungen konzipiert werden muss[reference:4].

Die wichtigsten Themenbereiche der Norm sind folgende[reference:5]:

• Auswahl der Prüfproben
• Auswahl repräsentativer Teile aus dem Medizinprodukt
• Aufbereitung der Prüfproben und Referenzmaterialien
• Experimentelle Kontrollen
• Auswahl und Anforderungen an Referenzmaterialien
• Herstellung von Extrakten (Extraktionsgefäße, Bedingungen und Verfahren; spezielle Bedingungen für in situ polymerisierende Materialien)
• Aufzeichnungen

Extraktionsbedingungen und Auswahl der Lösungsmittel

Das Herzstück der Norm bilden die in Abschnitt 10.3 definierten Extraktionsbedingungen. Das Grundprinzip lautet, dass der gewonnene Extrakt nicht weniger aggressiv sein darf als die Bedingungen bei der klinischen Anwendung [Referenz:6].

Lösungsmittel (Extraktionsmittel): Im Allgemeinen wird die Verwendung sowohl von polaren (z. B. Wasser, physiologische Kochsalzlösung, Zellkulturmedium) als auch von unpolaren (z. B. Pflanzenöl, n-Hexan) Lösungsmitteln empfohlen[Referenz:7]. Unter gerätespezifischen Bedingungen (z. B. bei einer vorgefüllten Spritze, die ausschließlich mit Kochsalzlösung in Kontakt kommt) kann jedoch eine Extraktion mit einem einzigen Lösungsmittel ausreichend sein[Reference:8]. Die ausgewählten Lösungsmittel müssen mit dem Material verträglich sein und dürfen es nicht beschädigen[Reference:9].

Temperatur und Dauer: Die Extraktionsbedingungen variieren je nach Kontaktdauer des Geräts (begrenzt, langfristig, dauerhaft). Bei Geräten mit begrenztem Kontakt werden für den Zytotoxizitätstest typischerweise (37 ± 1) °C für (24 ± 2) Stunden empfohlen[Reference:10]. Bei Geräten mit längerer und dauerhafter Kontaktzeit wird hingegen eine Extraktion von 72 Stunden empfohlen, da eine 24-stündige Extraktion möglicherweise nicht die Chemikalien widerspiegelt, die nach Ablauf der 24 Stunden freigesetzt werden. Liegen jedoch Daten vor, die belegen, dass eine 24-stündige Extraktion ausreichend ist und eine Verlängerung auf 72 Stunden keine zusätzliche Freisetzung von Chemikalien zur Folge hat, so sind 24 Stunden ausreichend[Reference:11].

Oberflächen-Volumen-Verhältnis: Bei festen Geräten wird das Verhältnis der Oberfläche zum Extraktionsvolumen (z. B. 3 cm²/ml oder 6 cm²/ml) verwendet, bei unregelmäßig geformten oder massenbasierten Geräten hingegen das Masse-Volumen-Verhältnis (z. B. 0,2 g/ml)[Reference:12].

Die in der Studie berichteten grundlegenden Parameter sind folgende:

• Auswahl der Testprobe und Definition der repräsentativen Teile des Geräts
• Methode der Probenvorbereitung (Zerschneiden, Zerkleinern, Messung der Oberfläche usw.)
• Verwendetes Extraktionslösungsmittel/Extraktionslösungsmittel (polar/unpolar) und Begründung für die Auswahl
• Extraktionstemperatur und Extraktionsdauer
• Fläche/Volumen oder Masse/Volumen-Verhältnis
• Extraktionsgefäß und -bedingungen
• Falls Referenzmaterial verwendet wurde: Beschreibung und Zertifizierungsstatus
• Beschreibung der experimentellen Kontrollen
• Spezielle Extraktionsbedingungen für in situ polymerisierte Materialien (falls zutreffend)
• Beschreibung der Aufzeichnungen und der Rückverfolgbarkeit

Warum wird sie durchgeführt?

EN ISO 10993-12 wird für die folgenden wissenschaftlichen und regulatorischen Zwecke angewendet:

• Schaffung einer Grundlage für die Validität biologischer Tests: Die Ergebnisse aller anderen biologischen Tests gemäß ISO 10993 (Zytotoxizität, Sensibilisierung, Reizung, Implantation, systemische Toxizität usw.) hängen direkt von der in dieser Norm definierten Qualität der Probenvorbereitung ab
• Gewinnung von Extrakten, die den klinischen Einsatz widerspiegeln: Sicherstellen, dass die Extraktionsbedingungen nicht weniger aggressiv sind als die tatsächlichen Einsatzbedingungen des Produkts[reference:13]
• Gewährleistung von Reproduzierbarkeit und Vergleichbarkeit: Erzielung konsistenter, vergleichbarer Ergebnisse zwischen verschiedenen Laboren und Studien
• MDR-Konformität: Dokumentation einer geeigneten Probenvorbereitung und der Verwendung von Referenzmaterialien für die biologische Sicherheitsbewertung im Rahmen der EU-Medizinprodukteverordnung (2017/745)[reference:14]
• Sicherstellung der experimentellen Kontrolle durch Referenzmaterialien: Überprüfung der ordnungsgemäßen Funktion des Testsystems und Gewährleistung der Vergleichbarkeit zwischen Laboren
• Gerätespezifische wissenschaftliche Begründung: In Fällen, in denen Standardansätze bei komplexen Geräten nicht ausreichen, Entwicklung spezieller Probenvorbereitungsstrategien auf der Grundlage der Material- und klinischen Anwendungsbedingungen[reference:15]
• Dokumentation und Rückverfolgbarkeit: Sicherstellung, dass der Probenvorbereitungsprozess bei behördlichen Kontrollen transparent und überprüfbar ist

EN ISO 10993-12 ist keine eigenständige Prüfnorm, sondern eine Verfahrens- und Infrastrukturnorm. Die Ergebnisse müssen im Zusammenhang mit der durchgeführten biologischen Prüfung selbst und der chemischen Charakterisierung des Medizinprodukts (ISO 10993-18) interpretiert werden.

Als NanoTest führen wir die Probenvorbereitungs- und Referenzmaterialprozesse im Rahmen von EN ISO 10993-12 mit wissenschaftlicher Sorgfalt auf der Grundlage unserer akkreditierten Laborinfrastruktur und unseres Qualitätsmanagementsystems durch.

Für Informationen zu Probenauswahl, Extraktionsstrategie, Auswahl von Lösungsmitteln und Bedingungen, Beschaffung von Referenzmaterialien sowie zu den Dokumentations- und Berichtsprozessen im Rahmen Ihrer Probenvorbereitungs- und Referenzmaterialprozesse gemäß EN ISO 10993-12 können Sie sich gerne an NanoTest wenden.