EN ISO 10993-10

EN ISO 10993-10:2023

EN ISO 10993-10:2023 ist die europäische Fassung der von der Internationalen Organisation für Normung (ISO) veröffentlichten und vom Europäischen Komitee für Normung (CEN) übernommenen Norm „Biologische Bewertung von Medizinprodukten – Teil 10: Prüfungen auf Hautsensibilisierung“, d. h. „Biologische Bewertung von Medizinprodukten – Teil 10: Prüfungen auf Hautsensibilisierung“. Der Grundtext ISO 10993-10:2021 (vierte Ausgabe) wurde unverändert als EN ISO 10993-10:2023 übernommen. Der Geltungsbereich der Norm definiert Verfahren zur Bewertung des Potenzials von Medizinprodukten und deren Bestandteilen, eine Hautsensibilisierung (verzögerte Überempfindlichkeit) hervorzurufen[reference:1].

Änderung des regulatorischen Status und des Geltungsbereichs: Während die Fassung von 2010 der Norm sowohl Reizungs- (Irritations-) als auch Hautsensibilisierungsprüfungen umfasste, konzentriert sich die Fassung von 2021 ausschließlich auf Hautsensibilisierung. Reizungstests wurden in die Norm ISO 10993-23:2021 übertragen[reference:2][reference:3]. Die Fassung von 2010 wird jedoch in einigen regulatorischen Kontexten und bei der Bewertung bestehender Unterlagen weiterhin als historischer Bezugspunkt herangezogen[reference:4]. EN ISO 10993-10:2023 wurde im Rahmen der EU-Medizinprodukteverordnung (MDR 2017/745) als harmonisierte Norm anerkannt.

Das Grundprinzip der Norm besteht darin, zu bewerten, ob von Materialien oder Extrakten medizinischer Produkte freigesetzte Chemikalien nach Hautkontakt eine verzögerte Überempfindlichkeitsreaktion hervorrufen. Für Verfahren zur Extraktvorbereitung wird auf ISO 10993-12 verwiesen[reference:6]. Die Bewertung erfolgt im Rahmen eines stufigen Ansatzes (stufige Teststrategie); nach der chemischen Charakterisierung und der Auswertung der vorliegenden Daten werden geeignete biologische Tests ausgewählt[reference:7].

Die im Rahmen der Norm verwendeten wichtigsten Testmethoden sind folgende:

In-vivo-Methoden (obligatorische/Hauptmethoden)

• Guinea-Pig-Maximisationstest (GPMT): Adjuvans-basierte Methode (Freund’s Complete Adjuvant); gilt als der empfindlichste Meerschweinchen-Test[reference:8]. Er umfasst Induktions- und Provokationsphasen durch intradermale und topische Anwendung.
• Buehler-Test (Closed-Patch-Test): Induktion und Provokation ohne Adjuvans mittels okklusivem Pflaster; er ist weniger empfindlich als der GPMT, erfordert jedoch keine Verwendung eines Adjuvans[Reference:9].
• Muriner lokaler Lymphknotentest (LLNA): Alternative In-vivo-Methode, die auf der topischen Anwendung am Mäuseohr und der Messung der Lymphknotenzellproliferation basiert[Referenz:10]. Validiert im Rahmen der OECD TG 429.

In-vitro-Alternativen (Anhang C – informativ)

Anhang C der Norm listet die im Rahmen der OECD-Leitlinie TG 442 validierten In-vitro-Methoden zur Hautsensibilisierung auf[Referenz:11]. Zu diesen Methoden gehören RhE-basierte Tests (Reconstructed Human Epidermis), h-CLAT, LuSens, SENS-IS, EpiSensA und GARDskin[Referenz:12][Referenz:13]. Eine wesentliche Einschränkung besteht jedoch darin, dass diese Methoden für Extrakte aus Medizinprodukten nicht vollständig validiert sind und in Zulassungsanträgen In-vivo-Tests nicht vollständig ersetzen können[reference:14][reference:15].

Die in der Studie berichteten Schlüsselparameter sind folgende:

• Verwendete Testmethode (GPMT, Buehler, LLNA oder in vitro) und deren Begründung
• Bedingungen für die Herstellung der Testsubstanz/des Extrakts (gemäß ISO 10993-12)
• Anwendung Dosis/Konzentrationen und Trägerstoff (Vehikel)
• Bedingungen der Induktions- und Challenge-Phase
• Hautreaktionswerte nach der Challenge (Erythem, Ödem)
• Anzahl/Prozentsatz der reagierenden Tiere
• Für den LLNA: Stimulationsindex (SI)
• Für In-vitro-Tests: Zellviabilität und Biomarker-Spiegel
• Validität der positiven und negativen Kontrollen
• Ergebnis: Bewertung und Begründung „sensibilisierend / nicht sensibilisierend“
• Daten zur Messunsicherheit und Wiederholbarkeit

Wozu wird der Test durchgeführt?

EN ISO 10993-10 wird für die folgenden wissenschaftlichen und regulatorischen Zwecke durchgeführt:

• Bewertung der Sicherheit von Medizinprodukten: Ermittlung des Potenzials von Produktmaterialien oder deren Extrakten, beim Patienten eine Hautsensibilisierung (Kontaktallergie) hervorzurufen
• MDR-Konformität: Bereitstellung der für die biologische Sicherheitsbewertung im Rahmen der EU-Medizinprodukteverordnung (2017/745) vorgeschriebenen Daten
• Risikomanagement: Bewertung und Minderung des Sensibilisierungsrisikos an den Teilen des Produkts, die mit dem Patienten und dem Anwender in Kontakt kommen
• Materialauswahl und -entwicklung: Früherkennung potenziell sensibilisierender Materialien und Bewertung von Alternativen im Rahmen des Produktentwicklungsprozesses
• Unterstützung bei Zulassungsunterlagen: Verwendung als Teil des Biokompatibilitätsdossiers bei Anträgen bei der FDA, gemäß der EU-MDR und anderen Aufsichtsbehörden
• Tierschutz (3R): Einsatz von In-vitro-Alternativen und eines stufenweisen Ansatzes, wo immer möglich; Unterstützung der regulatorischen Tendenzen zur Reduzierung von Tierversuchen gemäß MDR und FDA Modernization Act 2.0[reference:17]
• Ansatz der Beweiskraft: Beitrag zur ganzheitlichen Bewertung des Produkts in Verbindung mit Daten zur chemischen Charakterisierung (ISO 10993-18), Zytotoxizität (ISO 10993-5), Reizwirkung (ISO 10993-23) und anderen Biokompatibilitätsdaten

EN ISO 10993-10 deckt für sich allein nicht das gesamte Biokompatibilitätsprofil des Produkts ab. Die Ergebnisse müssen in Verbindung mit der chemischen Charakterisierung, anderen biologischen Tests und klinischen Daten interpretiert werden. Da die behördliche Akzeptanz von In-vitro-Alternativen für Extrakte aus Medizinprodukten bislang begrenzt ist, können in kritischen Fällen In-vivo-Daten erforderlich sein.

Als Nano-Test führen wir Hautsensibilisierungsbewertungen gemäß EN ISO 10993-10 im Rahmen unserer akkreditierten Laborinfrastruktur und unseres Qualitätsmanagementsystems mit wissenschaftlicher Sorgfalt durch. Unser Leistungsumfang umfasst Folgendes:

Erstellung der Teststrategie und des Protokolls

• Festlegung einer mehrstufigen Teststrategie entsprechend der Art des Kontakts, der Kontaktdauer und der Materialzusammensetzung des Produkts
• Auswertung der vorliegenden chemischen Charakterisierung (ISO 10993-18) und der toxikologischen Daten
• Auswahl und Begründung der geeigneten Prüfmethode (GPMT, Buehler, LLNA oder in vitro)
• Festlegung einer Strategie zur Extraktvorbereitung gemäß ISO 10993-12 (polare/nichtpolare Lösungsmittel, Temperatur, Dauer)[reference:18]
• Planung von Positiv- und Negativkontrollen; Einhaltung ethischer und regulatorischer Anforderungen

Für Informationen zu Teststrategien, Methodenauswahl, Extraktaufbereitung, Probenannahmekriterien, Testzeitplan und Berichtsprozessen im Rahmen Ihrer Hautsensibilisierungsbewertungen gemäß EN ISO 10993-10 können Sie sich gerne an Nano-Test wenden.