La TG 475 de l'OCDE est la norme intitulée « Mammalian Bone Marrow Chromosomal Aberration Test », c'est-à-dire le test d'aberration chromosomique sur la moelle osseuse de mammifères, qui figure dans la section 4 (Effets sur la santé) des lignes directrices de l'OCDE relatives à l'évaluation des substances chimiques. Ce test sert à évaluer la capacité d’une substance d’essai à provoquer, dans des conditions in vivo, des aberrations chromosomiques structurelles dans les cellules de la moelle osseuse.
Le principe de base du test consiste à examiner au microscope les altérations de la structure chromosomique dans des cellules en métaphase prélevées dans la moelle osseuse après administration du produit. L'évaluation est généralement réalisée sur la moelle osseuse de souris ou de rats. La substance à tester est administrée par une voie d'administration appropriée ; afin d'induire un arrêt en métaphase, du colcemid ou un agent similaire est administré dans un délai approprié. Les cellules de moelle osseuse sont prélevées et, après traitement hypotonique, fixation, étalement et coloration, des préparations en métaphase sont réalisées.
Les principales aberrations structurelles étudiées sont les suivantes :
Aberrations chromatidiennes : cassures chromatidiennes, échanges chromatidiens
Aberrations chromosomiques : cassures chromosomiques, fragments, chromosomes en anneau, chromosomes dyscentriques, échanges
- Si nécessaire, des altérations numériques telles que la polypoïdie peuvent également être détectées ; toutefois, l'objectif premier du test est la mise en évidence d'aberrations chromosomiques structurelles.
Lors de l'évaluation, on examine généralement au moins 100 métaphases bien étalées par animal. De plus, des indicateurs tels que l'indice mitotique peuvent être utilisés pour évaluer l'effet cytotoxique sur la moelle osseuse. Le protocole expérimental comprend un témoin négatif, un témoin solvant et des groupes témoins positifs appropriés ; la taille des groupes et la détermination des doses sont justifiées conformément à la ligne directrice 475 de l'OCDE et aux exigences réglementaires applicables.
Pourquoi ce test est-il réalisé ?
Le projet TG 475 de l'OCDE est mené aux fins scientifiques et réglementaires suivantes :
Identification d'un risque génotoxique : évaluation du potentiel de la substance d'essai à provoquer des aberrations chromosomiques structurelles dans la moelle osseuse
Preuve d'un effet clastogène : évaluation du potentiel clastogène sur la base des cassures chromosomiques et des altérations structurelles
Validation des résultats in vitro : suivi in vivo des substances jugées positives ou suspectes lors d'essais de génotoxicité in vitro
Assistance à la constitution des dossiers d'autorisation : utilisation dans le cadre de l'évaluation de la sécurité des produits chimiques, des médicaments, des pesticides, des produits biocides, des dispositifs médicaux et des produits biotechnologiques
Approche fondée sur la force probante : contribution à l'évaluation des risques en association avec d'autres tests de génotoxicité, des données physico-chimiques et l'évaluation de l'exposition
- Sécurité des produits et assurance qualité : documentation relative au profil de sécurité biologique des matières premières, des produits intermédiaires ou des produits finis
La méthode TG 475 de l'OCDE n'est pas un test de cancérogénicité à part entière. Elle sert à identifier un risque génotoxique ; ses résultats doivent être interprétés conjointement avec d'autres données de génotoxicité in vivo et in vitro.
Dans le cadre de Nano-Test, nous réalisons les analyses conformément à la ligne directrice 475 de l'OCDE avec rigueur scientifique, en nous appuyant sur notre infrastructure de laboratoire accréditée et notre système de gestion de la qualité. Notre gamme de prestations comprend les éléments suivants :
Conception de l'étude et élaboration du protocole
- Élaboration d'un protocole d'étude conformément à la ligne directrice n° 475 de l'OCDE
Détermination de la plage de dosage et définition du protocole d'essai principal en fonction des propriétés physico-chimiques de la substance testée
Définition du témoin négatif, du témoin « solvant » et des groupes témoins positifs appropriés ; justification scientifique du mode d'administration, des niveaux de dosage, de la durée d'administration et des moments de prélèvement des échantillons ; respect des exigences en matière d'autorisation éthique et de bien-être animal
La TG 475 de l’OCDE évalue les aberrations chromosomiques structurelles dans des tissus à division cellulaire rapide, tels que la moelle osseuse. Elle peut ne pas refléter à elle seule les effets spécifiques à certains tissus ou survenant uniquement dans certains types de cellules. La sensibilité vis-à-vis des altérations chromosomiques numériques peut être limitée ; des essais supplémentaires, tels que le test des micronoyaux, peuvent être nécessaires pour évaluer le potentiel anogénétique. Lors de l’interprétation des résultats, il convient de tenir compte de la pharmacocinétique de la substance d’essai, de son activation métabolique, des différences entre les espèces ainsi que d’autres essais de génotoxicité réalisés simultanément. Dans le cadre des processus décisionnels réglementaires, cet essai ne doit pas être évalué isolément, mais dans le cadre d’une approche fondée sur le « poids de la preuve ».
Pour toute information concernant la conception des essais, les conditions de réception des échantillons et les procédures de rapport dans le cadre de vos études conformes à la ligne directrice 475 de l'OCDE, vous pouvez contacter Nano-Test.