La TG 423 de l'OCDE est la norme intitulée « Toxicité orale aiguë – Méthode des classes de toxicité aiguë », c'est-à-dire « Toxicité orale aiguë – Méthode des classes de toxicité aiguë », qui figure dans la section 4 (Effets sur la santé) des Lignes directrices de l’OCDE pour les essais sur les produits chimiques (OECD Test Guidelines for the Testing of Chemicals). Elle a été adoptée pour la première fois en 1996 et mise à jour en 2001. Ce test est un test de toxicité in vivo destiné à évaluer les effets toxiques aigus d’une substance après une seule administration par voie orale.
L'objectif principal de la ligne directrice n° 423 de l'OCDE est de déterminer le potentiel de toxicité orale aiguë de la substance ainsi que sa classification GHS/CLP, et ce en utilisant moins d'animaux et en accordant la priorité au bien-être animal par rapport à l'approche classique de détermination de la DL50. La méthode utilise des doses fixes et un plan d'essai par paliers (Staircase); plutôt que de déterminer une valeur exacte de LD50, elle vise à établir à quelle classe de toxicité appartient la substance.
Le principe de base du test est le suivant :
- La substance d'essai est administrée par voie orale aux animaux à des doses fixes déterminées (généralement 5, 50, 300 et 2 000 mg/kg de poids corporel).
- En règle générale, trois animaux (le plus souvent des rates) sont utilisés par niveau de dosage ; en fonction des résultats, d'autres animaux peuvent être ajoutés ou l'on peut passer au niveau de dosage suivant.
- L'administration s'effectue généralement chez le rat, sous forme de dose unique et dans un excipient approprié.
- Les animaux sont maintenus sous observation clinique pendant au moins 14 jours; on note alors les signes de toxicité, la réversibilité, les variations de poids corporel et la mortalité.
- À la fin de l'étude, une autopsie est pratiquée et les résultats macroscopiques sont consignés.
- Grâce à ce protocole d'essai par paliers, il n'est pas nécessaire de tester tous les niveaux de dosage ; en fonction du taux de mortalité observé, on passe au niveau de dosage immédiatement supérieur ou inférieur.
Les principales caractéristiques de la procédure sont les suivantes :
- Niveaux de dose fixes : 5, 50, 300 et 2 000 mg/kg
- Conception par paliers (Staircase) : passage d'un palier de dose à l'autre en fonction de la réponse en termes de mortalité
- Dose initiale : elle est choisie sur la base des données disponibles et des similitudes structurelles ; en règle générale, on privilégie une valeur initiale de 300 mg/kg
- Réduction du nombre d'animaux : par rapport aux tests LD50 classiques, le nombre d'animaux utilisés est nettement inférieur
- Classification GHS/CLP : les données de mortalité obtenues sont utilisées pour déterminer les catégories de toxicité orale aiguë
Les principaux paramètres présentés dans l'étude sont les suivants :
- Les niveaux de dose administrés (mg/kg) et le nombre d'animaux par niveau
- Constatations cliniques et leur apparition
- Variations du poids corporel
- Mortalité et durée de survie
- Résultats de l'autopsie
- Catégorie GHS/CLP relative à la toxicité orale aiguë et justification de la classification
- Fourchette estimée de la DL50 (pas de valeur exacte)
- Espèce animale utilisée, sexe, âge, voie d'administration et conditions d'utilisation
- Données relatives à l'incertitude de mesure et à la répétabilité
Pourquoi est-elle réalisée ?
Le projet TG 423 de l'OCDE est mené à des fins scientifiques et réglementaires, à savoir :
- Évaluation de la toxicité orale aiguë : identification des effets toxiques et des organes cibles après une exposition orale unique
- Classification GHS/CLP : détermination de la catégorie de toxicité orale aiguë de la substance et définition des exigences en matière d'étiquetage
- Priorité accordée au bien-être animal (les 3R) : réduction du nombre d'animaux par rapport aux tests classiques de DL50 et limitation des douleurs et souffrances graves
- Assistance pour les dossiers d'autorisation : utilisation dans le cadre des évaluations de sécurité des produits chimiques, des pesticides, des produits biocides, des médicaments et des dispositifs médicaux
- Contribution à l'évaluation des risques : fourniture de données de base pour l'évaluation des risques dans des scénarios d'exposition aiguë
- Hiérarchisation : examen d'un grand nombre de substances et définition des priorités pour la poursuite des essais
- Étiquetage et transport : les données relatives à la toxicité orale aiguë sont utilisées dans le cadre de la classification aux fins de l'étiquetage et du transport des produits chimiques
- Approche fondée sur la force probante : contribution à l'évaluation globale de la substance en liaison avec d'autres données toxicologiques, physico-chimiques et d'exposition
La ligne directrice n° 423 de l'OCDE ne vise pas à déterminer une valeur LD50 univoque; elle fournit plutôt une classification fondée sur des données de mortalité par paliers. Les résultats doivent être interprétés en tenant compte de la structure chimique de la substance, d’autres données relatives à la toxicité aiguë (par exemple, les TG 420 et 425), de la toxicité par administration répétée ainsi que de l’évaluation de l’exposition.
Dans le cadre de Nano-Test, nous réalisons des études de toxicité orale aiguë conformément à la ligne directrice 423 de l'OCDE, avec toute la rigueur scientifique requise, en nous appuyant sur notre infrastructure de laboratoire accréditée et notre système de gestion de la qualité. Notre offre de services comprend les éléments suivants :
Conception de l'étude et élaboration du protocole
Rédaction d'un rapport d'essai conformément à la ligne directrice n° 423 de l'OCDE
Justification scientifique de la dose initiale et du schéma posologique progressif, sur la base des propriétés physico-chimiques de la substance testée et des données de toxicité disponibles
Sélection d'un vecteur (véhicule) approprié et évaluation de la solubilité et de la stabilité ; détermination de l'espèce animale, du sexe, de l'âge et des conditions d'administration ; respect des exigences éthiques en matière d'autorisation et de bien-être animal ; planification d'un protocole d'essai par étapes visant à réduire au minimum le nombre d'animaux utilisés
Pour toute information concernant la conception de l'essai, le choix de la dose initiale, l'adéquation du support, les conditions de réception des échantillons, le calendrier et les procédures de rapport pour vos études de toxicité orale aiguë conformément à la ligne directrice 423 de l'OCDE, n'hésitez pas à contacter Nano-Test.