Test di sensibilizzazione - Valutazione della biocompatibilità secondo EN ISO 10993-10
I dispositivi medici possono innescare non solo una reazione fisica, ma anche una reazione immunologica al contatto con il corpo umano.
Una di queste reazioni è sensibilizzazione, in cui il corpo sviluppa una reazione allergica alle sostanze chimiche o ai componenti del materiale contenuti nel prodotto. Il test sensibilizzazione - EN ISO 10993-10 è uno standard riconosciuto a livello internazionale per valutare se i dispositivi medici possono innescare tali reazioni allergiche.
La EN ISO 10993-10 è intitolata "Valutazione biologica dei dispositivi medici - Parte 10: test di sensibilizzazione cutanea". Questo standard definisce i metodi utilizzati per determinare se il prodotto ha reazioni di ipersensibilità ritardata (ipersensibilità di tipo IV) quando il prodotto è a contatto con il prodotto o quando viene applicato al corpo. Per le applicazioni MDR (2017/745) e FDA-510(K), questo test è obbligatorio in conformità con i principi GLP (Good Laboratory Practices).
Che cos'è la sensibilizzazione e perché viene testata?
La sensibilizzazione è il processo in cui il sistema immunitario sviluppa una "memoria" per questa sostanza dopo il primo contatto del corpo con una sostanza e innesca una grave reazione allergica nel secondo contatto. Questa reazione è solitamente espressa sotto forma di arrossamento della pelle, gonfiore, prurito ed eczema. Le sostanze nei dispositivi medici che possono innescare tali reazioni includono:
- Ammorbidenti e stabilizzanti: ftalati, resine epossidiche
- Leghe metalliche: Nichel, cobalto, cromo
- Componenti in lattice e gomma: proteine naturali in lattice, acceleratori di vulcanizzazione
- Adesivi e rivestimenti: acrilati, resine di formaldeide
- Residui di sterilizzazione: residui di ossido di etilene
Il test di sensibilizzazione dimostra scientificamente se il prodotto fornisce queste sostanze all'organismo attraverso la pelle o sistematicamente e se innesca una reazione allergica. Prima di eseguire il test, viene effettuata la caratterizzazione chimica del prodotto (ISO 10993-18) per determinare quali sostanze possono essere rilasciate.
Procedure di test di sensibilizzazione
La EN ISO 10993-10 raccomanda tre procedure principali per la valutazione della sensibilizzazione. La scelta del metodo dipende dall'uso previsto del prodotto, dalla durata del contatto e dalle proprietà dell'estratto da testare.
1. GPMT (Test di massimizzazione della cavia - Test di massimizzazione della cavia)
Questo è il metodo più utilizzato, considerato il gold standard. Il test viene effettuato su porcellini d'India (cavia) attraverso una combinazione di iniezione intradermica e applicazione topica. La sostanza in esame viene miscelata con l'adiuvante completo di Freund (FCA) per migliorare la risposta del sistema immunitario. Dopo la fase di induzione, la sostanza in esame viene nuovamente somministrata (fase di sfida) agli animali e vengono valutate le reazioni cutanee.
2. Test di Buehler (test patch chiuso)
È stato sviluppato come alternativa al GPMT. Con questo metodo, la sostanza in esame viene applicata sulla pelle delle cavie sotto forma di un cerotto chiuso (patch). Non viene utilizzata alcuna iniezione. È particolarmente adatto per prodotti utilizzati localmente ed estratti altamente concentrati.
3. LLNA (dosaggio dei linfonodi locali - test dei linfonodi locali)
In questo metodo sui topi, la proliferazione cellulare (propagazione) nei linfonodi dell'orecchio viene misurata utilizzando marker radioattivi o tecniche di bioluminescenza per determinare il potenziale di sensibilizzazione. Poiché è più adatto ai principi 3R (sostituzione, riduzione, raffinatezza), ora è sempre più preferito. Tuttavia, potrebbe non essere adatto per alcuni estratti di dispositivi.
Confronto delle procedure di test di sensibilizzazione
La tabella seguente riassume i metodi di prova di sensibilizzazione utilizzati in EN ISO 10993-10:
| Metodo | Modello animale | Modulo di domanda | Vantaggi | Svantaggi |
|---|---|---|---|---|
| GPMT | Porcellino d'India | Iniezione intradermica + patch topico | Alta sensibilità, gold standard, ampiamente riconosciuto | Richiede più animali, dura a lungo (~30 giorni) |
| Test di Buehler | Porcellino d'India | Pavimentazione chiusa (argomento) | Nessuna iniezione, adatta per applicazioni topiche | La sensibilità può essere inferiore a GPMT |
| Llna | Topo (topo) | Topico (pelle d'orecchio) | Meno animali, conformi a 3R, risultati quantitativi | Uso di sostanze radioattive (in alcune varianti), non adatto a determinate sostanze |
Come funziona la procedura di test di sensibilizzazione?
L'esecuzione di un test di sensibilizzazione per un dispositivo medico richiede un'attenta procedura. Questo processo è progettato per riflettere le condizioni cliniche di utilizzo del prodotto:
- 1. Preparazione ed estrazione del campione: Il prodotto viene estratto con solventi polari e non polari secondo ISO 10993-12. Di conseguenza, le sostanze chimiche che potrebbero essere rilasciate dal dispositivo medico vengono trasferite alla soluzione.
- 2. Impostazione della dose: La concentrazione dell'estratto viene calcolata in base alla dose di applicazione clinica e alla superficie del dispositivo medico.
- 3. Fase di induzione: La sostanza in esame viene somministrata agli animali secondo il metodo scelto. Questa fase assicura che il sistema immunitario sia sensibilizzato alla sostanza.
- 4. Fase di sfida: Dopo un certo tempo, la sostanza in esame viene nuovamente somministrata a bassa concentrazione.
- 5. Osservazione e valutazione: Le reazioni cutanee (eritema ed edema) vengono valutate dopo 24, 48 e 72 ore. La valutazione si basa sulla scala Magnusson e Kligman.
- 6. Reporting: i risultati sono documentati in conformità con gli standard GLP. È indicato se il prodotto ha un potenziale di sensibilizzazione.
Servizi di test di sensibilizzazione conforme a GLP con nano test
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Nano test - Descrizione dei servizi
Nano-Test offre Test di sensibilizzazione per dispositivi medici secondo EN ISO 10993-10. Nei nostri laboratori pre-ospedalieri, accreditati a GLP (Buona pratica di laboratorio) e ISO/IEC 17025, i metodi GPMT (test per massimizzare il numero di animali da test), Buehler-Test e LLNA (linfonodo locale test) applicato.
Il nostro processo di servizio include l'estrazione del tuo prodotto conforme a ISO 10993-12, l'ottimizzazione della dose, le fasi di test in vivo e le valutazioni istopatologiche. Tutti i lavori vengono eseguiti nel rispetto delle approvazioni dei Comitati Etici per gli animali da prova e sotto controllo veterinario. I risultati sono forniti come Rapporti di conformità GLP con tracciabilità completa, che puoi utilizzare per le tue applicazioni MDR e FDA-510(k).
In Nano-Test, non solo eseguiamo test, ma ti supportiamo anche nella creazione della tua strategia di biocompatibilità (BEP) e ti forniamo dati validi per la comunicazione con le autorità di approvazione.
Vantaggi del test di sensibilizzazione del nano-test:
- Selezione completa di metodi: Tutti i metodi - GPMT, Buehler e LLNA - sono disponibili.
- Infrastruttura certificata GLP: Tutti gli studi sono condotti in conformità con i principi GLP e i requisiti di AlcoA+.
- Pianificazione rapida: A seconda della categoria del dispositivo e del tempo di contatto, viene determinata la strategia di test più adatta.
- Team di veterinari specialisti: il benessere degli animali di prova e degli standard etici è mantenuto al massimo livello.
- Compliance con i principi 3R: Ove possibile, si raccomandano metodi come LLNA che richiedono meno animali.
La sensibilizzazione è una delle reazioni indesiderabili più comuni e fastidiose che possono essere causate dai dispositivi medici.
Test di sensibilizzazione - EN ISO 10993-10 è un passaggio cruciale per dimostrare scientificamente se il tuo prodotto è a rischio. La scelta del metodo di prova giusto, l'esecuzione corretta dell'estrazione e la segnalazione dei risultati in conformità con gli standard GLP sono un prerequisito per un buon funzionamento del processo di approvazione normativa.
Con la sua infrastruttura preclinica, il suo personale specializzato e i suoi processi conformi al GLP, Nano-Test soddisfa in modo completo i requisiti dei produttori di dispositivi medici per i test di sensibilizzazione. Collabora con Nano Test per aumentare la sicurezza del tuo prodotto e accelerare l'accesso al mercato.