I biocidi sono preparati che contengono sostanze chimiche attive e vengono utilizzati in un'ampia gamma, dai disinfettanti ai pesticidi ai conservanti del legno e alle vernici antivegetative. A seconda dell'uso previsto, questi prodotti possono entrare in contatto diretto o indiretto con la pelle umana. Prodotti come disinfettanti per le mani, detergenti per superfici e pesticidi in particolare possono avere un effetto potenzialmente irritante sulla pelle. Pertanto, il test di irritazione della pelle per i biocidi è una valutazione obbligatoria sia per quanto riguarda la sicurezza dei dipendenti che la salute dei consumatori finali.
Ai sensi del regolamento sui biocidi (BPR - 528/2012) dell'Unione europea, il potenziale di irritazione cutanea di un biocida deve essere valutato scientificamente per consentirlo. In Turchia, requisiti simili sono stati adottati nella legislazione nazionale dal Ministero della Salute emesso dal Ministero della Salute. Queste valutazioni devono essere effettuate secondo metodi riconosciuti a livello internazionale e secondo i principi GLP (Good Laboratory Practices).
L'importanza dell'irritazione cutanea nei prodotti biocidi
L'irritazione cutanea è una reazione infiammatoria locale innescata da una sostanza a contatto con la pelle e non dovuta al sistema immunitario. È caratterizzato da arrossamento (eritema), gonfiore (edema), siccità, crepe e talvolta necrosi. Nel caso dei biocidi, questo rischio è particolarmente critico nei seguenti casi:
- Esposizione professionale: I dipendenti che lavorano con pesticidi, disinfettanti industriali e conservanti del legno sono esposti a un contatto cutaneo duraturo e ripetuto.
- Uso del consumatore: Disinfettanti per la casa, prodotti per l'igiene delle mani e spray per il controllo dei parassiti comportano il rischio di contatto diretto con la pelle.
- Contatto accidentale: esposizioni acute che possono derivare da un uso improprio o dalla fuoriuscita dei prodotti.
- Ingredienti di formulazione: Ingredienti come tensioattivi, solventi, acidi e basi possono aumentare il rischio di irritazione.
La determinazione precoce del potenziale di irritazione cutanea dei biocidi garantisce che l'etichetta del prodotto contenga avvisi appropriati e che vengano prese le misure protettive necessarie.
Metodi per test di irritazione cutanea
Esistono due approcci di base riconosciuti a livello internazionale per valutare l'irritazione cutanea nei prodotti biocidi: metodi in vivo (animali vivi) e in vitro (coltura cellulare). In conformità con i principi 3R (sostituzione, riduzione, raffinatezza), i metodi in vitro sono sempre più preferiti.
1. Test di irritazione cutanea in vivo (OECD TG 404)
La guida all'esame dell'OCSE 404 definisce la procedura standard per il test di irritazione/corrosione cutanea acuta. Con questo metodo, la sostanza in esame viene applicata sulla pelle rasata di conigli sani. Dopo 4 ore di contatto, la sostanza viene rimossa e dopo 24, 48 e 72 ore, le reazioni cutanee (eritema ed edema) vengono valutate su una scala da 0 a 4.
Come parte dell'OCSE TG 404, viene prima valutato se la sostanza in esame è corrosiva. Se la sostanza è corrosiva, non è necessario un test di irritazione. Questo è un passaggio che impedisce il test animale non necessario.
2. Test di irritazione cutanea in vitro (OCSE TG 439)
L'approccio moderno dà la priorità ai modelli in vitro per ridurre al minimo l'uso degli animali. L'OCSE TG 439 è una guida di test convalidata per l'irritazione cutanea in vitro. Questo metodo utilizza modelli di tessuti tridimensionali (RHE) realizzati da cellule della pelle umana.
- Epiderm™, Episkin™, Skiethic™: equivalenti della pelle umana validati in commercio.
- Metodo di prova: La sostanza in esame viene applicata al tessuto per 18-24 ore, quindi la vitalità cellulare viene misurata mediante test MTT.
- Valutazione: una perdita di vitalità superiore al 50% è classificata come irritante.
I metodi in vitro vengono sempre più utilizzati nella valutazione di routine dei prodotti biocidi a causa della rinuncia agli esperimenti sugli animali, della rapida somministrazione dei risultati e della riproducibilità.
3. Test di corrosione (OECD TG 431 e TG 435)
Il potenziale di corrosione è un parametro che deve essere controllato prima che venga valutata l'irritazione cutanea. Le sostanze corrosive sono determinate utilizzando l'OCSE TG 431 (test di corrosione cutanea in vitro) e l'OCSE TG 435 (test di barriera alla membrana in vitro). Nessun test di irritazione viene eseguito su sostanze che sono state riscontrate come corrosione.
Confronto di metodi di prova per l'irritazione cutanea nei biocidi
La tabella seguente riassume i metodi utilizzati per valutare l'irritazione cutanea dei biocidi:
| Metodo di prova | Modello | Tempo di applicazione | Criterio di valutazione | Vantaggi |
|---|---|---|---|---|
| OCSE TG 404 (in vivo) | Coniglio | 4 Ore di contatto + 72 ore di osservazione | Punteggio Eritema/Edema (0–4) | Dati clinici, riconoscimento ufficiale |
| OCSE TG 439 (in vitro) | Equivalente per la pelle umana (RHE) | 18-24 Ore | Vitalità cellulare (MTT) | Nessun esperimento animale, veloce, riproducibile |
| OCSE TG 431 (effetto corrosivo) | Equivalente della pelle umana | 3 Min, 1 ora, 4 ore | Vitalità cellulare (<35% = corrosione) | A prova di corrosione, nessun esperimento sugli animali |
| OCSE TG 435 (barriera a membrana) | Membrana artificiale | Per un breve periodo | Danno alla membrana | Pre-screening veloce, rilevamento della corrosione |
Test di irritazione cutanea ai sensi del BPR e della legislazione nazionale
Nell'ambito del BPR (528/2012), per l'approvazione di un biocida deve essere effettuata una valutazione separata dell'irritazione cutanea per il principio attivo e il prodotto finito. Queste valutazioni devono essere conformi alle linee guida dell'ECHA e alle linee guida per i test dell'OCSE.
Nel fascicolo di approvazione per il principio attivo, viene valutato il potenziale di irritazione cutanea del principio attivo stesso. Nel fascicolo di approvazione del prodotto, invece, viene valutato il potenziale di irritazione cutanea del prodotto finale (principio attivo + sostanze ausiliarie). In particolare, deve essere preso in considerazione il contributo di additivi come tensioattivi, solventi e regolatori di pH al rischio di irritazione.
Test di irritazione cutanea conforme a GLP per prodotti biocidi con nano-test
Per i produttori di biocidi, i test di irritazione cutanea costituiscono la base per il processo di approvazione e per la valutazione della sicurezza del prodotto. Nano-Test è un partner di soluzioni affidabili per il settore dei biocidi con i suoi servizi di analisi conformi al GLP in questo settore.
Nano test - Descrizione dei servizi
Nano-test offre test di irritazione della pelle (test di irritazione della pelle) per i prodotti biocidi. Nei nostri laboratori accreditati a GLP e ISO/IEC 17025, in vivo (OCSE TG 404) e in vitro (OCSE TG 439, TG 431, TG 435) Metodi applicati.
Il nostro portafoglio di servizi:
- Test di irritazione cutanea in vitro (OCSE TG 439): Misurazione della vitalità cellulare con modelli RHE, risultati rapidi senza esperimenti sugli animali.
- Test dell'irritazione cutanea in vivo (OCSE TG 404): Valutazione di eritema ed edema sul modello di coniglio, dati clinici riconosciuti dalle autorità di vigilanza.
- Test di corrosione (OECD TG 431/435): Identificazione di sostanze corrosive, evitando inutili test di irritazione.
- Reporting conforme al BPR: report nel pieno rispetto delle guide ECHA e allegati BPR.
- Convalida del metodo: Sviluppo e convalida di metodi specificamente adattati alla matrice del prodotto.
Tutte le nostre analisi sono presentate come report conformi al GLP che dispongono di un permesso di ispezione e garantiscono l'integrità dei dati (principi Alcoa+).
Vantaggi del nano-test nel test di irritazione cutanea del biocida:
- Competenza in entrambi i metodi: test di irritazione sia in vivo che in vitro in un'unica posizione.
- Conformità BPR: Completa conformità alle linee guida ECHA e ai requisiti BPR.
- 3R Principi: I metodi in vitro sono preferiti quando possibile.
- Risultati rapidi: Segnalazione dei test in vitro entro 3-5 giorni lavorativi.
- Team specialista: Un team con esperienza nei settori della tossicologia, del diritto biocida e della chimica analitica.
L'irritazione cutanea, che può essere causata dai biocidi, comporta un rischio significativo sia nell'esposizione professionale che nella sicurezza dei consumatori. Il test di irritazione cutanea del biocida è essenziale per valutare questo rischio scientificamente e le necessarie avvertenze di allegare all'etichetta del prodotto. La selezione di un metodo corrispondente alle linee guida per l'ispezione dell'OCSE, la corretta implementazione e la segnalazione conforme al GLP sono prerequisiti per l'approvazione della domanda di approvazione nell'ambito del BPR.
Con la sua infrastruttura di laboratorio accreditata GLP, il suo personale specializzato e la ben fondata conoscenza delle vigenti normative legali, Nano-Test soddisfa in modo completo i requisiti dei produttori di biocidi per i test di irritazione cutanea. Collabora con Nano-Test per aumentare la sicurezza dei tuoi prodotti e accelerare l'accesso al mercato.