Test de détection des nitrosamines dans les médicaments : détection d'impuretés cancérigènes et solutions « Nano-Test »
En 2018, l'industrie pharmaceutique a connu une grave crise due à la contamination par la N-nitrosodiméthylamine (NDMA), détectée dans des médicaments contre l'hypertension appartenant au groupe des « sartans ». Cet incident a entraîné le rappel de millions de médicaments à l'échelle mondiale et a incité les autorités de régulation à modifier en profondeur leur approche en matière de tests de détection des nitrosamines dans les médicaments. Aujourd’hui, le contrôle des contaminations par les nitrosamines fait partie intégrante du développement des médicaments et des processus de production.
Les nitrosamines sont des composés dont la structure chimique contient un groupe N-nitroso (R1N(-R2)-N=O). Bon nombre d’entre elles ont montré un fort effet cancérigène lors d’essais sur les animaux. Leur formation dans les médicaments peut dépendre de nombreux facteurs, notamment la synthèse des matières premières, le processus de fabrication, les matériaux d’emballage et même les conditions de stockage. C’est pourquoi une surveillance continue à l’aide de méthodes analytiques précises et fiables est indispensable afin de ne pas exposer les patients à ces composés nocifs.
Sources et mécanismes de formation des impuretés de type nitrosamine
Les nitrosamines peuvent se retrouver dans les médicaments de différentes manières ou s’y former spontanément. Le mécanisme de formation le plus courant est la réaction d’amines secondaires ou tertiaires avec l’acide nitreux (HNO₂) ou des sels de nitrite. Cette réaction est accélérée en milieu acide.
- Provenant des matières premières : les solvants, catalyseurs ou matières premières utilisés lors de la synthèse du principe actif pharmaceutique (API) peuvent contenir des impuretés de type nitrosamine.
- Lien avec le processus : certains excipients utilisés au cours de la fabrication peuvent contenir du nitrite et réagir avec les amines présentes dans le principe actif.
- En raison du conditionnement : les emballages sous blister, en particulier ceux contenant des encres d'impression à base de nitrocellulose, peuvent entraîner la migration de nitrosamines volatiles dans le médicament.
- Conditions de stockage : une humidité et une température élevées sont des facteurs qui accélèrent la formation de nitrosamines.
Seuils fixés par les autorités de surveillance et législation en vigueur
L'Agence européenne des médicaments (EMA), l'Agence américaine des produits alimentaires et médicamenteux (FDA) et l'Agence turque des médicaments et des dispositifs médicaux (TİTCK) ont fixé des limites extrêmement basses pour les impuretés de type nitrosamine. Ces limites ont été calculées sur la base d’un « scénario d’exposition à vie » et visent à maintenir le risque de cancer à un niveau négligeable.
Pour la NDMA, l'une des nitrosamines les plus courantes, la dose journalière admissible (DJA) a été fixée à 96 ng/jour. Cela signifie que la quantité maximale de NDMA pouvant être présente dans la dose journalière d'un médicament est de une partie par milliard (ppb). Pour pouvoir détecter des concentrations aussi faibles, il est nécessaire de recourir à des techniques d'analyse hautement sensibles.
Les autorités de contrôle exigent des titulaires d'une autorisation de mise sur le marché (titulaires d'autorisation) qu'ils procèdent à une évaluation des risques pour tous leurs produits et qu'ils effectuent des essais de confirmation pour les produits chez lesquels un risque a été identifié. Ce processus se déroule en trois étapes : « Étape 1 : Évaluation des risques », « Étape 2 : Essais de confirmation » et « Étape 3 : Gestion des changements ».
Contaminants de type nitrosamine faisant l'objet d'une surveillance régulière
- NDMA (N-nitrosodiméthylamine) : l'une des nitrosamines cancérigènes les plus courantes et les plus puissantes.
- NDEA (N-nitrosodiéthylamine) : également détectée dans des médicaments de la classe des sartans et dans certains antihistaminiques.
- NMBA (acide N-nitroso-N-méthyl-4-aminobutyrique) : a été détecté dans des médicaments tels que le valsartan.
- NIPEA (N-nitrosoéthyl-isopropylamine) : a été détectée dans certains médicaments génériques.
- NDSRI (impuretés de type nitrosamine liées aux principes actifs pharmaceutiques) : il s'agit de nitrosamines de nouvelle génération issues du principe actif lui-même, qui ont fait l'objet d'une attention particulière ces dernières années.
Nitrosamines courantes et valeurs limites de l'apport quotidien admissible (AI)
Le tableau suivant récapitule les impuretés de type nitrosamine les plus fréquemment détectées dans les médicaments, ainsi que les limites fixées par les autorités de contrôle pour la dose journalière admissible :
| Nom de la nitrosamine | Formule chimique | Valeur limite admissible journalière (AI) | Classe de cancérogénicité |
|---|---|---|---|
| NDMA (N-nitrosodiméthylamine) | C₂H₆N₂O | 96 ng/jour | Groupe 2A du CIRC (probablement cancérigène) |
| NDEA (N-nitrosodiéthylamine) | C₄H₁₀N₂O | 26,5 ng/jour | Groupe 2A du CIRC (probablement cancérigène) |
| NMBA (acide N-nitroso-N-méthyl-4-aminobutyrique) | C₅H₁₀N₂O₃ | 96 ng/jour | Groupe 2B du CIRC (peut-être cancérigène) |
| NIPEA (N-nitrosoéthyl-isopropylamine) | C₅H₁₂N₂O | 26,5 ng/jour | Groupe 2B du CIRC (peut-être cancérigène) |
Méthodes analytiques pour l'analyse des nitrosamines
La détection des nitrosamines nécessite des techniques analytiques extrêmement sensibles en raison des faibles limites de détection, de l'ordre du ppb (parties par milliard). Les méthodes HPLC classiques ne permettent souvent pas d'atteindre ce niveau de sensibilité.
1. LC-MS/MS (chromatographie en phase liquide – spectrométrie de masse)
Il s'agit actuellement de la référence absolue en matière d'analyse des nitrosamines. Grâce à leur sélectivité et à leur sensibilité élevées, les nitrosamines peuvent être détectées de manière fiable, même dans des matrices médicamenteuses complexes et à de très faibles concentrations. Le mode de surveillance à réactions multiples (MRM) minimise les résultats faussement positifs en suivant les transitions ioniques spécifiques.
2. GC-MS/MS (chromatographie en phase gazeuse – spectrométrie de masse)
Convient aux nitrosamines volatiles (telles que la NDMA et la NDEA). Peut être utilisée avec des techniques d'analyse en espace de tête ou par injection directe. Cette méthode peut toutefois ne pas convenir à certaines nitrosamines thermiquement instables.
3. HRMS (spectrométrie de masse à haute résolution)
Un outil performant pour l'identification et la caractérisation structurelle des impuretés nitrosamiques inconnues. Il joue notamment un rôle déterminant dans la détection des NDSRI.
Services de tests de nitrosamines conformes aux bonnes pratiques de laboratoire (GLP) avec Nano-Test
La réalisation d'évaluations des risques liés aux nitrosamines et d'analyses de confirmation pour les fabricants de médicaments nécessite un savoir-faire approfondi et une infrastructure adaptée.
Grâce à ses services d'analyse conformes aux bonnes pratiques de laboratoire (BPL), Nano-Test est le partenaire le plus fiable de l'industrie pharmaceutique dans ce domaine.
Description des services de nano-tests
Nano-Test propose à l'industrie pharmaceutique une gamme complète de services dans le domaine de l'analyse des impuretés de type nitrosamine. Nos laboratoires, accrédités selon les bonnes pratiques de laboratoire (BPL) et la norme ISO/IEC 17025, réalisent des analyses conformes à toutes les limites en vigueur fixées par l'EMA, la FDA et la TİTCK.
Notre gamme de prestations comprend la détection et la quantification de toutes les nitrosamines courantes, y compris la NDMA, la NDEA, la NMBA, la NIPEA et la NDSRI. Nos analyses s'appuient sur des équipements de pointe tels que la LC-MS/MS, la GC-MS/MS et la HRMS. Pour chaque analyse, nous utilisons des méthodes entièrement validées, conformes aux monographies correspondantes de la pharmacopée et aux directives actuelles des autorités de contrôle.
Chez Nano-Test, nous ne nous contentons pas de fournir un résultat d’essai, mais nous établissons également des rapports de conformité aux BPL complets et fondés, que vous pouvez utiliser pour vos demandes d’autorisation et qui sont acceptés lors des inspections. Nous vous accompagnons tout au long des différentes étapes, de l’évaluation des risques jusqu’aux essais de confirmation.
Les avantages de Nano-Test pour l'analyse des nitrosamines :
- Limites de détection extrêmement basses : capacité de détection inférieure à la plage des ppb (ng/g) par LC-MS/MS.
- Validation complète : validation de la méthode conformément à la norme ICH Q2(R1) et aux lignes directrices correspondantes.
- Rapports rapides : résultats fournis sous 10 jours ouvrés pour les analyses standard.
- Une équipe d'experts : une équipe de chimistes spécialisés dans la spectrométrie de masse et l'analyse des profils de contamination.
- Suivi de la réglementation en vigueur : adaptation immédiate aux dernières modifications des valeurs limites publiées par l'EMA et la FDA.
Les impuretés de type nitrosamine comptent parmi les problèmes de qualité et de sécurité les plus graves de l'industrie pharmaceutique. Afin de garantir la sécurité des patients et de répondre aux exigences des autorités de contrôle, le test de détection des nitrosamines dans les médicaments n'est désormais plus une option, mais une obligation. Le choix des méthodes d'analyse appropriées, leur validation rigoureuse et la communication des résultats conformément aux normes BPL revêtent une importance cruciale.
Grâce à son infrastructure technologique de pointe et à son équipe d'experts, Nano-Test accompagne les fabricants de médicaments dans la gestion des risques liés aux nitrosamines. Confiez vos analyses de nitrosamines à Nano-Test pour garantir à vos produits un accès sans encombre aux marchés mondiaux.