OECD TG 416 ist der Standard „Two-Generation Reproduction Toxicity Study“, d. h. die Zweigenerationen-Reproduktionstoxizitätsstudie, der im Abschnitt 4 (Gesundheitseffekte) der OECD-Prüfrichtlinien für die Prüfung von Chemikalien enthalten ist. Der Test zielt darauf ab, die Auswirkungen einer Prüfsubstanz auf die Fortpflanzungsfunktionen, die Schwangerschaft, die Geburt, die Laktation und die Entwicklung der Nachkommen über zwei aufeinanderfolgende Generationen (P, F1 und F2) hinweg zu bewerten.
Anmerkung zum regulatorischen Status: Die OECD TG 416 wurde von der OECD außer Kraft gesetzt und weitgehend durch die OECD TG 443 (Extended One-Generation Reproductive Toxicity Study, EOGRTS) ersetzt. Dennoch wird TG 416 in bestimmten regulatorischen Rahmenwerken weiterhin als Referenz bei der Bewertung bestehender Unterlagen und der Interpretation historischer Zweigenerations-Datensätze herangezogen.
Das Grundprinzip des Tests besteht darin, männliche und weibliche Tiere der P-Generation ab der Zeit vor der Paarung mit der Testsubstanz zu behandeln, sie zu paaren und die F1-Generation zu gewinnen. Die F1-Generation wird ebenfalls der Dosierung ausgesetzt, gepaart und die F2-Generation gewonnen. Auf diese Weise werden die Fortpflanzungsfunktionen und die Entwicklung der Nachkommen über zwei aufeinanderfolgende Generationen hinweg beobachtet. Die Bewertung erfolgt in der Regel an Ratten.
Die in der Studie bewerteten grundlegenden Parameter sind folgende:
Eltern- (P) und F1-Generation – Fortpflanzungsfunktion:
- Gonadenfunktion und Östruszyklus
- Paarungsverhalten, Paarungs- und Fertilitätsindizes
- Befruchtungs- und Trächtigkeitsindizes
- Spermienparameter (Anzahl, Motilität, Morphologie)
- Histopathologische Untersuchung der Fortpflanzungsorgane
Trächtigkeit, Geburt und Laktation:
- Trächtigkeitsdauer und Geburtsverlauf
- Daten zu Lebendgeburten, Totgeburten und Resorption
- Laktationsleistung und Überlebensrate der Jungtiere
- Überlebensrate vor und nach dem Absetzen
Nachkommengeneration (F1 und F2):
- Lebendgeburten und Überlebensrate nach der Geburt
- Körpergewicht und Wachstumskurve
- Indikatoren der körperlichen Entwicklung (Öffnen der Augen, Zahndurchbruch usw.)
- Gegebenenfalls Erfassung der Geschlechterverteilung und von Entwicklungsanomalien
- Fortpflanzungsleistung der F1-Generation (Gewinnung der F2-Generation)
Das Versuchsdesign umfasst eine Negativkontrollgruppe, eine Lösungsmittelkontrollgruppe und gegebenenfalls eine Positivkontrollgruppe; Dosierungen, Gruppengröße und Anwendungsdauer werden gemäß den regulatorischen Anforderungen der OECD-Leitlinie 416 begründet.
Warum wird die Studie durchgeführt?
Die OECD-Leitlinie 416 wird zu folgenden wissenschaftlichen und regulatorischen Zwecken durchgeführt:
Ermittlung der Reproduktionstoxizität: Feststellung der Auswirkungen der Prüfsubstanz auf die männliche und weibliche Fertilität über zwei Generationen hinweg
Bewertung entwicklungsbezogener Auswirkungen: Feststellung von Auswirkungen, die während der Trächtigkeit, der Geburt und der Laktation auftreten
Überwachung intergenerationeller Auswirkungen: Bewertung der Fortpflanzungsleistung der F1-Generation und der Entwicklung der F2-GenerationUnterstützung von Zulassungsunterlagen: Verwendung bei Sicherheitsbewertungen von Chemikalien, Pestiziden, Biozidprodukten und IndustriechemikalienAuswertung historischer Daten: Bewertung bestehender TG 416-Studien im aktuellen regulatorischen Kontext und Vergleich mit TG 443-Daten
- Der „Weight-of-Evidence“-Ansatz: Beitrag zur Risikobewertung in Verbindung mit anderen Daten zur Reproduktions- und Entwicklungstoxizität, physikalisch-chemischen Eigenschaften und Expositionsbewertung
Obwohl die OECD TG 416 die Fortpflanzungsfunktionen und die Entwicklung der Nachkommen über zwei Generationen hinweg bewertet, ist ihre Aussagekraft hinsichtlich funktioneller Entwicklungsendpunkte, endokrin wirksamer Effekte und spät auftretender Effekte begrenzt. Daher stützen sich aktuelle behördliche Bewertungen auf die TG 443 und die zugehörigen Leitlinien. Die Ergebnisse sollten im Rahmen einer ganzheitlichen toxikologischen Bewertung interpretiert werden.
Als Nano-Test führen wir die Untersuchungen im Rahmen der OECD TG 416 sowie die Verfahren der OECD TG 443, dem aktuellen Äquivalent dieser Norm, mit wissenschaftlicher Sorgfalt im Rahmen unserer akkreditierten Laborinfrastruktur und unseres Qualitätsmanagementsystems durch. Unser Leistungsumfang umfasst Folgendes:
Studienkonzeption und Protokollerstellung
- Erstellung eines Versuchsprotokolls gemäß OECD TG 416 und dessen aktueller Entsprechung OECD TG 443
- Ermittlung des Dosierungsbereichs und Festlegung des Hauptversuchsaufbaus entsprechend den physikalisch-chemischen Eigenschaften der Testsubstanz
- Festlegung von Negativkontrollen, Lösungsmittelkontrollen und gegebenenfalls geeigneten Positivkontrollgruppen
- Wissenschaftliche Begründung der Artenauswahl, des Verabreichungswegs, der Dosierungen und der Anwendungsdauer
- Einhaltung der ethischen Genehmigungs- und Tierschutzanforderungen
Für Ihre Studien im Rahmen von OECD TG 416 und dessen aktueller Entsprechung OECD TG 443 können Sie sich an Nano-Test wenden, um Informationen zu Studiendesign, Artenauswahl, Probenannahmebedingungen, Testzeitplan und Berichtsprozessen zu erhalten.