OCDE TG 474 es el estándar "Prueba de micronúcleos de eritrocitos mamíferos", D. la Prueba de micronúcleos en eritrocitos de mamíferos, contenido en la Sección 4 (Efectos de la salud) de las Directrices de Pruebas Químicas de la OCDE. La versión actual de la Directriz de Prueba de la OCDE No. 474 es un método de prueba reconocido internacionalmente para evaluar la Potencial de genotoxicidad in vivo de sustancias químicas y otras sustancias de prueba.
El principio básico de la prueba se basa en la detección de la formación de micronuclei en los eritrocitos, que ocurren en la médula ósea o en la sangre periférica. Los micronúcleos son pequeñas estructuras similares a núcleos que surgen durante la división celular de fragmentos cromosómicos excéntricos o cromosomas completos entrantes últimamente entrantes que no están incluidos en el núcleo principal. Por lo tanto, la prueba permite la determinación de los efectos klastogénicos y aneugénico.
En los eritrocitos se examinan dos poblaciones celulares básicas:
- PCE (eritrocitos policromáticos): Eritrocitos jóvenes, ricos en ARN y policromáticos
- CE (eritrocitos normocromáticos): Eritrocitos normocromáticos maduros
Un aumento en la proporción de PCE con micronúcleos es el indicador más importante de un efecto genotóxico. La relación PCE/NCE, por otro lado, proporciona información sobre un efecto citotóxico o supresión de la médula ósea.
El sistema de prueba generalmente se realiza en ratones o ratas. Se puede usar médula ósea y/o sangre periférica. Dado que en las ratas, los eritrocitos con micronúcleos en la sangre periférica pueden eliminarse rápidamente del bazo, el examen de la médula ósea puede ser más adecuado; El uso de sangre periférica es ampliamente utilizado en ratones. La evaluación puede ser microscópica o por citometría de flujo.
¿Por qué se lleva a cabo?
La OCDE TG 474 se realiza con los siguientes fines científicos y regulatorios:
Identificación de peligros genotóxicos: Determinación del potencial de la sustancia de prueba para causar daño a la estructura del cromosoma o el número de cromosomas
Detección de efectos clastogénicos y aneuógenos: Evaluación de roturas cromosómicas y cambios en el número de cromosomas en condiciones in vivo
Validación de los resultados de la prueba in vitro: Seguimiento in vivo de sustancias en las que se obtuvieron resultados positivos o sospechosos en pruebas de genotoxicidad in vitro
Apoyo a los documentos de autorización: Uso en productos químicos, farmacéuticos, pesticidas, biocidas, dispositivos médicos y productos biotecnológicos
Contribución a la evaluación de riesgos: Interpretación del riesgo genotóxico junto con escenarios de exposición
- Seguridad del producto y garantía de calidad: Documentación del perfil de seguridad biológica de materias primas, productos intermedios o productos finales
La OCDE TG 474 no es una prueba de carcinogenicidad independiente. Se utiliza para determinar un riesgo genotóxico; Los resultados deben interpretarse junto con otras pruebas de genotoxicidad, datos físico-químicos y una evaluación de la exposición.
Como prueba nano, realizamos las investigaciones en el marco de la OCDE TG 474 con atención científica basada en nuestra infraestructura de laboratorio acreditada y nuestro sistema de gestión de calidad. Nuestro alcance de servicios incluye lo siguiente:
Concepción de estudio y creación de protocolos
- Creación de un protocolo de prueba según la OCDE TG 474
- Determinación del intervalo de dosificación y ajuste de la configuración de prueba principal de acuerdo con las propiedades fisicoquímicas de la sustancia de ensayo
- Determinación de controles negativos, controles de disolvente y grupos de control positivos adecuados
- Justificación científica de las vías de administración, dosis y tiempos de muestreo
- Cumplimiento de los requisitos de aprobación ética y bienestar animal
Para obtener más información sobre la planificación de pruebas, las condiciones de muestreo y los procesos de presentación de informes dentro del alcance de sus estudios de acuerdo con la OCDE TG 474, comuníquese con Nano-Test.