OECD TG 423 ist der Standard „Acute Oral Toxicity – Acute Toxic Class Method“, d. h. Akute orale Toxizität – Methode der akuten Toxizitätsklassen, der im Rahmen von Abschnitt 4 (Gesundheitseffekte) der OECD-Prüfrichtlinien für die Prüfung von Chemikalien (OECD Test Guidelines for the Testing of Chemicals) aufgeführt ist. Er wurde erstmals 1996 verabschiedet und 2001 aktualisiert. Bei dem Test handelt es sich um einen in vivo-Toxizitätstest zur Bewertung der akuten toxischen Wirkungen einer Substanz nach einer einzigen oralen Verabreichung.
Das Hauptziel von OECD TG 423 besteht darin, das akute orale Toxizitätspotenzial der Substanz sowie ihre GHS/CLP-Einstufung zu bestimmen, und zwar im Vergleich zum klassischen LD50-Bestimmungsansatz mit weniger Tieren und unter Vorrang für das Tierwohl. Die Methode arbeitet mit festen Dosierungen und einem stufenweisen (Staircase-)Design; statt einen exakten LD50-Wert zu ermitteln, zielt sie darauf ab, festzustellen, zu welcher Toxizitätsklasse die Substanz gehört.
Das Grundprinzip des Tests lautet wie folgt:
- Die Testsubstanz wird den Tieren oral in bestimmten festen Dosierungen (in der Regel 5, 50, 300 und 2000 mg/kg Körpergewicht) verabreicht.
- Pro Dosierungsstufe werden in der Regel drei Tiere (meist weibliche Ratten) verwendet; je nach den Ergebnissen können weitere Tiere hinzugefügt oder zur nächsten Dosierungsstufe übergegangen werden.
- Die Verabreichung erfolgt in der Regel an Ratten, als Einzeldosis und in einem geeigneten Trägerstoff (Vehikel).
- Die Tiere werden mindestens 14 Tage lang unter klinischer Beobachtung gehalten; dabei werden Anzeichen von Toxizität, Reversibilität, Veränderungen des Körpergewichts und die Mortalität erfasst.
- Am Ende der Studie wird eine Nekropsie durchgeführt und die makroskopischen Befunde werden dokumentiert.
- Dank des stufenweisen Versuchsdesigns müssen nicht alle Dosierungsstufen getestet werden; je nach beobachteter Mortalität wird zur nächsthöheren oder nächstniedrigeren Dosierungsstufe übergegangen.
Die wesentlichen Merkmale des Verfahrens sind:
- Feste Dosisstufen: 5, 50, 300 und 2000 mg/kg
- Stufenweises (Staircase-)Design: Wechsel zwischen den Dosisstufen je nach Mortalitätsreaktion
- Ausgangsdosis: Wird auf der Grundlage vorhandener Daten und struktureller Ähnlichkeiten ausgewählt; in der Regel werden 300 mg/kg als Ausgangswert bevorzugt
- Reduzierung der Tierzahl: Im Vergleich zu klassischen LD50-Tests werden deutlich weniger Tiere verwendet
- GHS/CLP-Einstufung: Die gewonnenen Mortalitätsdaten werden zur Bestimmung der Kategorien der akuten oralen Toxizität herangezogen
Die in der Studie berichteten Hauptparameter sind folgende:
- Die verabreichten Dosisstufen (mg/kg) und die Anzahl der Tiere pro Stufe
- Klinische Beobachtungsbefunde und deren Beginn
- Veränderungen des Körpergewichts
- Mortalität und Überlebenszeiten
- Obduktionsbefunde
- GHS/CLP-Kategorie für akute orale Toxizität und Begründung der Einstufung
- Geschätzter LD50-Bereich (kein exakter Wert)
- Verwendete Tierart, Geschlecht, Alter, Verabreichungsmethode und Anwendungsbedingungen
- Daten zur Messunsicherheit und Wiederholbarkeit
Warum wird sie durchgeführt?
Die OECD TG 423 wird für folgende wissenschaftliche und regulatorische Zwecke durchgeführt:
- Bestimmung der akuten oralen Toxizität: Ermittlung der toxischen Wirkungen und der Zielorgane nach einer einmaligen oralen Exposition
- GHS/CLP-Einstufung: Bestimmung der Kategorie der akuten oralen Toxizität des Stoffes und Festlegung der Kennzeichnungsanforderungen
- Vorrang des Tierschutzes (3R): Verringerung der Tierzahl im Vergleich zu klassischen LD50-Tests und Begrenzung schwerer Schmerzen/Leiden
- Unterstützung bei Zulassungsunterlagen: Verwendung bei Sicherheitsbewertungen von Chemikalien, Pestiziden, Biozidprodukten, Arzneimitteln und Medizinprodukten
- Beitrag zur Risikobewertung: Bereitstellung von Basisdaten für die Risikobewertung in akuten Expositionsszenarien
- Priorisierung: Durchsicht einer großen Anzahl von Stoffen und Festlegung von Prioritäten für weitere Tests
- Kennzeichnung und Transport: Daten zur akuten oralen Toxizität werden bei der Einstufung im Hinblick auf die Kennzeichnung und den Transport von Chemikalien verwendet
- Ansatz der Beweiskraft: Beitrag zur ganzheitlichen Bewertung der Substanz in Verbindung mit anderen toxikologischen, physikalisch-chemischen und Expositionsdaten
OECD TG 423 zielt nicht darauf ab, einen eindeutigen LD50-Wert zu ermitteln; stattdessen liefert sie eine Einstufung auf der Grundlage stufenweiser Mortalitätsdaten. Die Ergebnisse sollten im Zusammenhang mit der chemischen Struktur der Substanz, anderen Daten zur akuten Toxizität (z. B. TG 420, TG 425), der Toxizität bei wiederholter Verabreichung sowie der Expositionsbewertung interpretiert werden.
Als Nano-Test führen wir akute orale Toxizitätsstudien im Rahmen der OECD TG 423 mit wissenschaftlicher Sorgfalt unter Nutzung unserer akkreditierten Laborinfrastruktur und unseres Qualitätsmanagementsystems durch. Unser Leistungsumfang umfasst Folgendes:
Studienkonzeption und Protokollerstellung
Erstellung eines Versuchsprotokolls gemäß OECD TG 423
Wissenschaftliche Begründung der Ausgangsdosierung und des stufenweisen Dosierungsschemas auf der Grundlage der physikalisch-chemischen Eigenschaften der Testsubstanz und der vorliegenden Toxizitätsdaten
Auswahl eines geeigneten Trägers (Vehicle) sowie Bewertung der Löslichkeit und StabilitätFestlegung von Tierart, Geschlecht, Alter und VerabreichungsbedingungenEinhaltung der ethischen Genehmigungs- und TierschutzanforderungenPlanung eines stufenweisen Versuchsdesigns zur Minimierung der Tieranzahl
Für Informationen zu Versuchsdesign, Auswahl der Anfangsdosis, Eignung des Trägers, Probenannahmebedingungen, Zeitplan und Berichtsprozessen für Ihre akuten oralen Toxizitätsstudien gemäß OECD TG 423 können Sie sich gerne an Nano-Test wenden.