OECD TG 406 ist der Standard für „Skin Sensitisation“, d. h. Hautsensibilisierung, der in Abschnitt 4 (Gesundheitliche Auswirkungen) der OECD-Prüfrichtlinien für die Prüfung von Chemikalien enthalten ist. Er wurde erstmals 1981 verabschiedet und 1992 aktualisiert. Der Test ist ein in vivo-Test zur Bewertung des Potenzials einer Substanz, nach wiederholtem Hautkontakt eine verzögerte Überempfindlichkeitsreaktion (Typ IV) auszulösen, d. h. des Potenzials für eine Kontaktallergie.
Hinweis zum regulatorischen Status: Die OECD-TG 406 wurde in der aktuellen regulatorischen Praxis weitgehend durch die OECD-TG-442-Reihe (TG 442A, 442B, 442C, 442D, 442E und TG 429 LLNA) ersetzt. Dennoch wird TG 406 in einigen regulatorischen Rahmenwerken weiterhin als Referenz herangezogen, und zwar bei der Bewertung bestehender Dossiers, in Fällen, in denen der LLNA-Test nicht geeignet ist (z. B. bei Metallen oder bestimmten Substanzen, die falsch-negative oder falsch-positive Ergebnisse liefern), sowie bei der Interpretation historischer Datensätze.
Der Test umfasst zwei grundlegende Methoden:
Guinea Pig Maximisation Test (GPMT – Magnusson-Kligman):
- Es handelt sich um eine adjuvante Methode; dabei wird Freund’s Complete Adjuvant (FCA) verwendet
- Intradermale Induktion: Die Testsubstanz wird zusammen mit FCA unter die Haut injiziert (in der Regel am 0. Tag)
- Topische Induktion: Die Testsubstanz wird topisch auf dieselbe Stelle aufgetragen (in der Regel am 7. Tag)
- Challenge (erneute Exposition): Nach einer Ruhephase von etwa 14 Tagen (in der Regel am 21.–28. Tag) wird die Testsubstanz topisch auf eine neue Hautstelle aufgetragen
- Die Beobachtung erfolgt nach 24, 48 und 72 Stunden
- Aufgrund der Verwendung eines Adjuvans weist diese Methode eine höhere Sensitivität auf; sie ist vorteilhaft für den Nachweis schwacher Sensibilisatoren
Buehler-Test (okklusiver Patch-Test):
- Es handelt sich um eine adjuvansfreie Methode; es wird ausschließlich eine topische Anwendung verwendet
- Induktion: Die Testsubstanz wird in der Regel 6 Stunden lang unter einem okklusiven Pflaster appliziert; dieser Vorgang wird in der Regel einmal wöchentlich über drei Wochen wiederholt
- Challenge: Etwa 14 Tage nach der letzten Induktion wird die Substanz mit einem okklusiven Pflaster auf eine neue Stelle aufgetragen
- Die Beobachtung erfolgt nach 24, 48 und 72 Stunden
- Da kein Adjuvans verwendet wird, ist diese Methode weniger empfindlich; sie eignet sich zum Nachweis starker und mittelstarker Sensibilisatoren
Bei beiden Methoden erfolgt die Bewertung anhand der Magnusson-Kligman-Skala:
- Erythem: 0 (keines) – 1 (leicht, fleckig) – 2 (mittel, zusammenhängend) – 3 (schwer, ödematös/nekrotisch)
- Ödem: 0 (keines) – 1 (leicht) – 2 (mittel) – 3 (stark)
Die in der Studie berichteten Schlüsselparameter sind:
- Verwendete Methode (GPMT oder Buehler) und Begründung
- Induktions- und Challenge--Dosen, -Konzentrationen und -Träger
- Erythem- und Ödem-Scores nach dem Challenge (jedes Tier, jeder Beobachtungszeitpunkt)
- Anzahl der reagierenden Tiere und deren prozentualer Anteil
- Positivkontroll-Ergebnisse und Validitätskriterien
- GHS/CLP-Hautsensibilisierungskategorie (Kategorie 1, 1A, 1B oder nicht klassifiziert) und Begründung
- Verwendete Tierart, Geschlecht, Alter, Geräte und Umgebungsbedingungen
- Daten zur Messunsicherheit und Wiederholbarkeit
Warum wird sie durchgeführt?
Die OECD-TG 406 wird für die folgenden wissenschaftlichen und regulatorischen Zwecke durchgeführt:
- Bestimmung des Kontaktallergiepotenzials: Feststellung des Potenzials des Stoffes, nach wiederholtem Hautkontakt eine verzögerte Überempfindlichkeit auszulösen
- GHS/CLP-Einstufung: Bestimmung der Hautsensibilisierungskategorie des Stoffes (Kategorie 1, 1A, 1B) und Festlegung der Kennzeichnungsanforderungen (H317)
- Unterstützung von Zulassungsunterlagen: Verwendung bei Sicherheitsbewertungen von Chemikalien, Pestiziden, Biozidprodukten, Kosmetika, Arzneimitteln und Medizinprodukten
- Produktsicherheit und Kennzeichnung: Festlegung von Warnhinweisen und Sicherheitsmaßnahmen zum Schutz von Verbrauchern und Arbeitnehmern
- Auswertung historischer Daten: Bewertung bestehender TG-406-Studien im aktuellen regulatorischen Kontext und Vergleich mit Daten der TG-442-Reihe
- Fälle, in denen alternative Methoden ungeeignet sind: Einsatz von Meerschweinchenversuchen bei Stoffen, bei denen die LLNA ungeeignet ist oder zu irreführenden Ergebnissen führt (z. B. Metalle, bestimmte Tenside)
- Ansatz der Beweiskraft: Beitrag zur ganzheitlichen Bewertung des Stoffes in Verbindung mit anderen toxikologischen, physikalisch-chemischen und Expositionsdaten
- Qualitätskontrolle: Überwachung der Konsistenz des Sensibilisierungspotenzials von Stoffen in den Produktionsprozessen
OECD TG 406 liefert für sich genommen keine Informationen über systemische Toxizität, Reizwirkung oder Ätzwirkung; diese Wirkungen müssen in separaten Tests (z. B. TG 402, TG 404, TG 405) bewertet werden. Die Ergebnisse sollten im Zusammenhang mit den physikalisch-chemischen Eigenschaften des Stoffes, strukturellen Warnmerkmalen (structural alerts) und der Expositionsbewertung interpretiert werden.
Als Nano-Test führen wir Hautsensibilisierungsstudien gemäß OECD TG 406 sowie die Verfahren der OECD TG 442-Reihe, die das aktuelle Äquivalent dieser Norm darstellt, im Rahmen unserer akkreditierten Laborinfrastruktur und unseres Qualitätsmanagementsystems mit wissenschaftlicher Sorgfalt durch.
Unser Leistungsumfang umfasst Folgendes:
Auswahl und Begründung der geeigneten Methode (GPMT, Buehler oder TG 442-Reihe) entsprechend den Eigenschaften der Prüfsubstanz, den vorliegenden Daten und den regulatorischen Anforderungen
Bestimmung der Dosis/Konzentration (Ermittlung der Reizschwelle) und Konzeption der Hauptstudie
Festlegung der Negativkontrolle, der Vehikelkontrolle und geeigneter PositivkontrollgruppenWissenschaftliche Begründung hinsichtlich Art, Geschlecht, Alter, Vehikel und AnwendungsbedingungenEinhaltung der Anforderungen hinsichtlich ethischer Genehmigungen und des Tierschutzes
Um Informationen zur Methodenauswahl, Dosisfindung, Planung der Positivkontrollen, Probenannahmebedingungen, zum Testzeitplan und zu den Berichtsprozessen für Ihre Hautsensibilisierungsstudien im Rahmen der OECD TG 406 und deren aktueller Entsprechung, der OECD TG 442-Reihe, zu erhalten, können Sie sich an Nano-Test wenden.