OECD TG 404

OECD TG 404 ist der Standard „Acute Dermal Irritation/Corrosion“, d. h. Akute Hautreizung/Ätzwirkung, der im Rahmen von Abschnitt 4 (Gesundheitseffekte) der OECD-Prüfrichtlinien für die Prüfung von Chemikalien (OECD TG 404) aufgeführt ist. Er wurde erstmals 1981 verabschiedet und 2015 umfassend aktualisiert. Der Test dient der Bewertung der reversiblen Reizung oder der irreversiblen korrosiven Schädigung, die eine Substanz nach einer einzigen Hautapplikation auf der Haut verursacht.

Die aktuelle Fassung der OECD TG 404 verfolgt den Ansatz einer sequenziellen Teststrategie (sequential testing strategy). Das Hauptziel dieses Ansatzes besteht darin, den Einsatz von Tieren auf ein Minimum zu reduzieren und zu verhindern, dass ätzende Stoffe bei Tieren unnötiges Leiden verursachen:

1. Bewertung der vorliegenden Daten: Es werden strukturelle Ähnlichkeiten, die Fachliteratur, frühere Testergebnisse und physikalisch-chemische Eigenschaften (z. B. pH-Wert ≤ 2 oder ≥ 11,5) bewertet.
2. In-vitro-Tests: Gegebenenfalls wird die Ätzwirkung gemäß OECD TG 430 (In-vitro-Hautätzwirkung – Transwell) oder OECD TG 431 (In-vitro-Hautätzwirkung – Reconstructed Human Epidermis, RhE) bewertet. Zur Beurteilung der Reizwirkung kann OECD TG 439 (In-vitro-RhE-Reiztest) herangezogen werden.
3. In-vivo-Test (TG 404): Dieser wird nur durchgeführt, wenn In-vitro-Daten nicht ausreichen oder wenn dies aus regulatorischen Gründen erforderlich ist.

Das Grundprinzip des In-vivo-Tests lautet wie folgt:

• Die Testsubstanz wird in der Regel als Einzeldosis (meist 0,5 ml oder 0,5 g) auf eine enthaarte, gesunde Hautstelle eines Albino-Kaninchens aufgetragen.
• Die Applikationsstelle wird 4 Stunden lang unter einer halbgeschlossenen Abdeckung gehalten.
• Nach der Applikation wird überschüssige Substanz entfernt und die Haut nach 1, 24, 48 und 72 Stunden (und bei Bedarf über einen längeren Zeitraum) begutachtet.
• Erythem (Rötung) und Ödem (Schwellung) werden anhand des standardisierten Draize-Bewertungssystems (Skala von 0 bis 4) eingestuft.
• Die Untersuchung beginnt in der Regel mit einem einzigen Tier; wird Korrosivität oder eine starke Reizung beobachtet, wird der Test abgebrochen. Andernfalls wird er auf bis zu insgesamt drei Tiere ausgeweitet.
• Am Ende der Beobachtungszeit werden die Hautbefunde protokolliert; zudem werden Anzeichen einer systemischen Toxizität überwacht.

Die in der Studie berichteten Hauptparameter sind:

• Die aufgebrachte Stoffmenge und die Anwendungsbedingungen (Dauer, Art der Abdeckung, Bereich)
• Erythem- und Ödem-Scores (für jedes Tier und jeden Beobachtungszeitpunkt)
• Der Durchschnitt der Scores und die Bewertung der Reversibilität
• Das Vorhandensein und das Ausmaß einer korrosiven Wirkung
• Gegebenenfalls histopathologische Befunde
• GHS/CLP-Kategorie für Hautreizung/Ätzwirkung (Kategorie 1A, 1B, 1C, 2 oder nicht eingestuft) und Begründung
• Verwendete Tierart, Geschlecht, Alter und Umgebungsbedingungen
• Daten zur Messunsicherheit und Wiederholbarkeit

Warum wird diese Prüfung durchgeführt?

Die OECD-Testrichtlinie 404 wird für die folgenden wissenschaftlichen und regulatorischen Zwecke durchgeführt:

Bestimmung der dermalen Ätzwirkung: Ermittlung des Potenzials des Stoffes, irreversible Schäden an der Haut zu verursachen

Bestimmung der dermalen Reizwirkung: Ermittlung des Potenzials des Stoffes, eine reversible Entzündungsreaktion auf der Haut auszulösenGHS/CLP-Einstufung: Bestimmung der Hautätz- bzw. Hautreizungskategorie des Stoffes und Festlegung der Kennzeichnungsanforderungen (H314, H315, H318 usw.)Einstufung gemäß Transportvorschriften: Einstufung als ätzender Stoff im Rahmen von UN/ADRVorrang des Tierschutzes (3R): Reduzierung des Tierversuchs durch eine abgestufte Teststrategie und In-vitro-Methoden; Vermeidung unnötiger Schmerzen bei Tieren durch ätzende StoffeUnterstützung bei Zulassungsunterlagen: Verwendung bei Sicherheitsbewertungen von Chemikalien, Pestiziden, Biozidprodukten, Kosmetika, Arzneimitteln und MedizinproduktenProduktsicherheit und Kennzeichnung: Festlegung von Warnhinweisen und Sicherheitsmaßnahmen zum Schutz von Verbrauchern und ArbeitnehmernAnsatz der Beweiskraft: Beitrag zur ganzheitlichen Bewertung des Stoffes in Verbindung mit anderen toxikologischen, physikalisch-chemischen und Expositionsdaten

OECD TG 404 liefert für sich genommen keine Informationen über systemische Toxizität oder Sensibilisierung; diese Wirkungen müssen in separaten Tests (z. B. TG 402, TG 406, TG 442) bewertet werden. Die Ergebnisse sollten im Zusammenhang mit den physikalisch-chemischen Eigenschaften des Stoffes, den In-vitro-Daten und der Expositionsbewertung interpretiert werden.

Als Nano-Test führen wir die im Rahmen der OECD TG 404 vorgesehenen Untersuchungen zur akuten dermalen Reizung/Ätzwirkung mit wissenschaftlicher Sorgfalt im Rahmen unserer akkreditierten Laborinfrastruktur und unseres Qualitätsmanagementsystems durch. Unser Leistungsumfang umfasst Folgendes:

Sequentielle Teststrategie und Versuchsplanung

• Erstellung eines Versuchsplans gemäß der sequenziellen Teststrategie der OECD TG 404
• Bewertung der vorliegenden Daten, struktureller Ähnlichkeiten und physikalisch-chemischer Eigenschaften (insbesondere des pH-Werts)
• Gegebenenfalls Priorisierung von In-vitro-Tests (TG 430, TG 431, TG 439) und Auswertung ihrer Ergebnisse
• Wissenschaftliche Begründung der Fälle, in denen ein In-vivo-Test erforderlich ist
• Einhaltung der ethischen Genehmigungs- und Tierschutzanforderungen; Festlegung von Kriterien für einen vorzeitigen Abbruch

Um Informationen zur Planung einer stufenweisen Teststrategie, zur In-vitro-Vorabprüfung, zum Studiendesign, zu den Probenannahmebedingungen, zum Testzeitplan und zu den Berichtsprozessen für Ihre Untersuchungen zur akuten Hautreizung/Ätzwirkung gemäß OECD TG 404 zu erhalten, können Sie sich an Nano-Test wenden.