GLP-Sterilitätsprüfung bei pharmazeutischen Produkten: Methoden, Validierung und Nano-Test-Lösungen
Die Sterilitätsprüfung ist eine entscheidende mikrobiologische Analyse, mit der festgestellt wird, ob in als steril deklarierten pharmazeutischen Produkten lebende Mikroorganismen vorhanden sind. Bei Injektionspräparaten, Augentropfen, Infusionslösungen, biologischen Produkten und sterilen Medizinprodukten stellt dieser Test die letzte Sicherheitsbarriere für die Patientensicherheit dar. Das Vorhandensein lebender Mikroorganismen in einem Produkt kann zu schwerwiegenden, lebensbedrohlichen klinischen Folgen wie einer Sepsis führen.
Sterilitätstests, die im Rahmen der Guten Laborpraxis (GLP) durchgeführt werden, gewährleisten, dass die Ergebnisse zuverlässig, reproduzierbar und für die Zulassungsbehörden akzeptabel sind. In diesem Artikel werden wir die grundlegenden Methoden des pharmazeutischen GLP-Sterilitätstests, die Validierungsanforderungen sowie die akkreditierten Dienstleistungen von Nano-Test in diesem Bereich behandeln.
Was ist ein Sterilitätstest und warum muss er im Rahmen von GLP durchgeführt werden?
Ein Sterilitätstest wird durchgeführt, um die Wirksamkeit des Sterilisationsprozesses des Produkts zu überprüfen und nachzuweisen, dass das Endprodukt keine lebenden Mikroorganismen enthält. Ein Sterilitätstest allein garantiert jedoch nicht, dass eine Charge steril ist; diese Garantie wird in erster Linie durch die Validierung des Sterilisationsprozesses oder des aseptischen Herstellungsprozesses gewährleistet. Die Arzneibücher weisen ausdrücklich darauf hin: Der Test ersetzt nicht die Prozessvalidierung, sondern unterstützt sie[reference:0].
Die Durchführung von Sterilitätstests im Rahmen der GLP ist aus den folgenden Gründen zwingend erforderlich:
- Datenzuverlässigkeit: Die GLP legt strenge Vorschriften in Bezug auf Personalschulung, Kalibrierung der Geräte, Standardarbeitsanweisungen (SOP) und Datenintegrität (ALCOA+-Prinzipien) fest.
- Behördliche Anerkennung: Behörden wie die FDA, die EMA und die TİTCK verlangen bei Zulassungsanträgen GLP-konforme Sterilitätsprüfberichte.
- Dokumentation aseptischer Bedingungen: Es muss nachgewiesen werden, dass der Test unter aseptischen Bedingungen durchgeführt wurde und die Umgebungskontrollen regelmäßig überwacht wurden[reference:2].
Methoden zur Sterilitätsprüfung
Arzneibücher (Ph. Eur. 2.6.1, USP <71>, JP) definieren zwei grundlegende Methoden für die Sterilitätsprüfung: Membranfiltration und direkte Inokulation. Die Wahl der Methode hängt von der Art des Produkts und seinen physikalisch-chemischen Eigenschaften ab.
1. Membranfiltrationsverfahren
Sofern die Beschaffenheit des Produkts eine Filtration zulässt, ist das Membranfiltrationsverfahren die bevorzugte Methode[reference:3]. Bei diesem Verfahren wird das Produkt durch einen Membranfilter mit einer Porengröße von maximal 0,45 µm geleitet; Mikroorganismen werden auf dem Filter zurückgehalten, anschließend wird der Filter in ein geeignetes Nährmedium überführt und inkubiert.
Anwendungsbereiche: Wässrige Lösungen, alkoholhaltige oder ölhaltige Präparate, Produkte, die mit wässrigen oder ölhaltigen Lösungsmitteln mischbar sind.
Bei antimikrobieller Aktivität: Wenn das Produkt antimikrobielle Eigenschaften aufweist, wird die Membran mindestens dreimal gewaschen; der Waschzyklus darf maximal fünf Waschgänge à 100 ml pro Filter umfassen.
2. Direktinokulationsverfahren
In Fällen, in denen die Membranfiltration nicht geeignet ist (z. B. bei nicht filtrierbaren, viskosen oder partikelhaltigen Produkten), wird das Direktinokulationsverfahren angewendet. Bei diesem Verfahren wird das Produkt direkt in das Nährmedium überführt[reference:7]. Es eignet sich für Produkte ohne antimikrobielle Aktivität oder solche, bei denen diese Aktivität durch Verdünnung oder Inaktivierung beseitigt werden kann.
3. Verwendete Nährmedien
Bei der Sterilitätsprüfung werden zwei grundlegende Nährmedien verwendet[reference:9]:
- Fluid Thioglycollate Medium (FTM): Es ist in erster Linie für anaerobe Bakterien konzipiert, weist jedoch auch aerobe Bakterien nach.
- Soybean-Casein Digest Medium (SCDM): Es eignet sich sowohl zur Kultivierung von Pilzen als auch von aeroben Bakterien.
Inkubationsbedingungen: Für FTM 3 Tage bei 32,5 ± 2,5 °C (im Eignungstest) oder 14 Tage (im Routinetest); für SCDM 5 Tage bei 22,5 ± 2,5 °C (Eignung) oder 14 Tage (Routine).
Vergleich von Sterilitätstestverfahren
Die folgende Tabelle fasst die beiden grundlegenden Sterilitätstestverfahren zusammen:
| Verfahren | Prinzip | Geeignete Produkttypen | Anwendung bei antimikrobiellen Produkten | Vorteile |
|---|---|---|---|---|
| Membranfiltration | Das Produkt wird durch einen 0,45-µm-Filter geleitet; Mikroorganismen werden im Filter zurückgehalten und in das Nährmedium überführt. | Wässrige, alkoholische und ölige Lösungen; filtrierbare Produkte. | Die Membran wird mindestens dreimal gespült (max. 5 × 100 ml). | Bevorzugtes Verfahren; breites Anwendungsspektrum. |
| Direkte Inokulation | Das Produkt wird direkt in das Nährmedium überführt. | Nicht filtrierbare, viskose, partikelhaltige Produkte. | Die antimikrobielle Wirkung wird durch Verdünnung oder Inaktivierung aufgehoben. | Alternative in Fällen, in denen die Membranfiltration nicht geeignet ist. |
Validierung der Methodeneignung: Der Grundstein des Sterilitätstests
Ein Sterilitätstest ist nur dann gültig, wenn nicht nur die richtige Methode ausgewählt wird, sondern auch nachgewiesen wird, dass diese Methode für die Produktmatrix geeignet ist. Diese als „Methodeneignungsprüfung“ (method suitability test) bezeichnete Validierung bestätigt, dass die antimikrobielle Aktivität des Produkts unter den Testbedingungen ausreichend unterdrückt wird.
Die Validierung muss in folgenden Fällen durchgeführt werden:
- Wenn ein neues Produkt einer Sterilitätsprüfung unterzogen wird,
- Wenn Änderungen an den Versuchsbedingungen vorgenommen werden,
- Wenn sich die Zusammensetzung oder die Herstellungstechnologie des Produkts ändert.
Bei der Validierungsprüfung wird die antimikrobielle Aktivität des Produkts bewertet, indem beobachtet wird, ob sich die Teststämme (maximal 100 KBE) in Gegenwart des Produkts vermehren oder nicht. Wenn sich die Teststämme in Gegenwart des Produkts nicht vermehren, bedeutet dies, dass die antimikrobielle Aktivität nicht aufgehoben wurde, und die Validierung muss unter modifizierten Testbedingungen wiederholt werden.
GLP-konforme Sterilitätstest-Dienstleistungen mit Nano-Test
Die Gewährleistung der Sterilität Ihrer pharmazeutischen Produkte hängt nicht nur von der richtigen Testmethode ab, sondern auch davon, dass dieser Test in einem akkreditierten Labor gemäß den GLP-Grundsätzen und auf nachprüfbare Weise durchgeführt wird. Nano-Test ist mit seinen umfassenden mikrobiologischen Dienstleistungen in diesem Bereich ein zuverlässiger Lösungspartner für die pharmazeutische Industrie.
Nano-Test – Leistungsbeschreibung
Nano-Test bietet GLP-konforme Sterilitätstests (Sterility Test) für pharmazeutische Produkte an. Unsere Analysen werden in voller Übereinstimmung mit den Normen Ph. Eur. 2.6.1, USP <71> und ISO 11737-2:2019 durchgeführt[reference:15].
Unser Leistungsportfolio:
- Membranfiltrationsverfahren: Das bevorzugte Verfahren für filtrierbare Produkte; bei antimikrobiellen Produkten mit geeigneten Waschprotokollen.
- Direktinokulationsverfahren: Alternatives Verfahren für nicht filtrierbare Produkte; Beseitigung der antimikrobiellen Aktivität durch Verdünnung oder Inaktivierung.
- Validierung der Methodeneignung: Bewertung der antimikrobiellen Aktivität speziell für Ihre Produktmatrix und Nachweis der Methodeneignung.
- Qualitätskontrolle der Nährmedien: Bestätigung der wachstumsfördernden Eigenschaften der Nährmedien mittels Growth-Promotion-Test.
- Negativkontrolle: Gleichzeitige Durchführung geeigneter Negativkontrollen in jeder Testreihe.
- Berichterstattung: GLP-konforme, auditierte und von den Aufsichtsbehörden akzeptierte Berichte.
Alle unsere Arbeiten werden unter aseptischen Bedingungen durchgeführt, wobei die Datenintegrität (ALCOA+-Prinzipien) gewährleistet ist.
Vorteile des Sterilitätstests von Nano-Test:
- GLP-Akkreditierung: Mikrobiologielabor mit OECD-GLP-Konformitätserklärung.
- Pharmakopöe-Konformität: Vollständige Konformität mit den Standards Ph. Eur. 2.6.1, USP <71> und ISO 11737-2.
- Kompetenz in zwei Methoden: Sowohl Membranfiltration als auch Direktinokulation.
- Validierungsunterstützung: Nachweis der Validität der Prüfung durch eine auf Ihr Produkt zugeschnittene Methodenvalidierung.
- Schnelle Berichterstellung: Ergebnisse bei Standard-Sterilitätstests innerhalb von 3–5 Werktagen nach der Inkubation.
- Fachkundiges Team: Ein Team mit Erfahrung in pharmazeutischer Mikrobiologie und GLP-Validierung.
Die Sterilitätsprüfung bei pharmazeutischen Produkten ist die letzte Kontrollinstanz für die Patientensicherheit. Die Wahl der richtigen Methode (Membranfiltration oder direkte Inokulation), die lückenlose Durchführung der Methodengültigkeitsvalidierung und die Durchführung des Tests unter aseptischen Bedingungen gemäß den GLP-Grundsätzen sind für die Gültigkeit der Ergebnisse und die behördliche Anerkennung unerlässlich.
Nano-Test erfüllt mit seiner pharmakopöekonformen Infrastruktur, seiner GLP-Akkreditierung und seinem Fachpersonal umfassend die Anforderungen der Pharmahersteller an Sterilitätstests. Arbeiten Sie mit Nano-Test zusammen, um die Sterilitätssicherheit Ihrer Produkte zu dokumentieren und Ihren Zulassungsprozess zu beschleunigen.